绝对实用UVWin5.0 使用指南 - 图文

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UVWin 5

使用指南

北京普析通用仪器有限责任公司

前 言

1、总体介绍

UVWin5.0是继4.0版后我公司研制开发的一款全新的紫外可见分光光度计控制与分析软件。其主要功能是实现对紫外仪器的控制、测量、数据分析和数据处理。与前一版本相比较,UVWin5.0还溶入了一些比较新颖的功能。例如:用户管理、质量控制、安全机制、三维谱图和分析药典等等。UVWin5.0软件在设计上遵循了“优良实验室规范”中所规定的内容。包含对数据文件的加密处理,对仪器的自检验证等。另外,UVWin5.0软件将适用于我公司现有的所有紫外仪器(串行接口)。这也为软件升级提供了很大的方便。

2、章节安排

全书共分九个章节,分别从安装环境、用户界面、仪器控制、测量、结果处理等几个方面全面讲述UVWin5.0软件的使用方法及对数据的处理方法。下面,是各个章节具体内容的安排。

? 第一章 “软件的安装及配置”,将向您介绍UVWin5.0软件的运行环境及安装方法。您将学习

到如何正确的将UVWin5.0软件安装到您的计算机中。同时,还将学习到如何使用配置程序来设置软件的运行参数。

? 第二章 “软件环境介绍”,将向您介绍UVWin5.0的用户界面、菜单功能、环境设置、通讯端

口设置以及一些其他的界面处理功能。

? 第三章 “仪器控制”,将向您介绍UVWin5.0控制紫外可见分光光度计的一些方法。您将学习

到如何使用软件所提供的功能来控制仪器,完成仪器条件的设置以及仪器的校正。

? 第四章 “光度测量”,将向您介绍如何使用光度测量功能来完成您所需要的测量。您将学习到

有关光度测量功能的使用方法和参数设置的方法。

? 第五章 “光谱扫描”,将向您介绍如何使用光谱扫描功能来完成对样品的扫描定性测量。您将

学习到有关光谱扫描功能的使用方法和参数设置的方法。

? 第六章 “定量测定”,将向您介绍如何使用定量测定功能来完成对样品的定量分析。您将学习

到有关定量测定功能的使用方法和参数设置方法,以及校正曲线的设置和使用方法。

? 第七章 “时间扫描”,将向您介绍如何使用时间扫描功能对样品进行测量。您将学习到有关时

间扫描功能的使用方法和参数设置方法。

? 第八章 “DNA蛋白质测定”,将向您介绍如何使用DNA蛋白质测定功能对样品进行分析测量。

您将学习到有关DNA蛋白质测定功能的使用方法和参数设置方法。

? 第九章 “图形处理”,将向您介绍如何对扫描谱图进行后期处理。

? 第十章 “数据导出”,将向您介绍如何将测量数据导出到其他格式的文件中。

? 第十一章 “管理功能”,将向您介绍UVWin5.0软件中管理功能所涉及的内容。您将学习到如

何创建用户和组,如何设置安全机制以及如何记录操作日志等内容。

? 第十二章 “结束语”,将对本书中所讲述的内容进行总结。

3、本书约定

由于UVWin5.0软件是一款通用型软件,对于不同型号的仪器,软件的内容将会有所不同。因此,本书将以TU-1901型紫外可见分光光度计作为主要讲解对象,穿插其他仪器各自的特点,对软件的各方面功能进行介绍。希望您能够仔细阅读。

目 录

第1章 软件的安装及配置 ................................. 1 1.1 安装UVWIN5.0软件 .............................. 1 1.2 配置程序 ................................................. 3 1.3

本章小结 ................................................. 4

第2章 软件环境介绍 ......................................... 5 2.1 启动UVWIN5.0 ....................................... 5 2.2 熟悉UVWIN5.0的环境窗口 .................. 6 2.3

设置UVWIN5.0的工作环境 ................ 10

2.3.1

环境选项 ....................................... 10 2.3.2 界面布局 ........................................ 11 2.3.3 自定义工具 ................................... 12 2.3.4 通讯端口 ....................................... 13 2.4 小结 ....................................................... 13

第3章 仪器控制 ............................................... 14 3.1 仪器性能 ............................................... 14 3.2 能量设置 ............................................... 15 3.3 基线校正 ............................................... 16 3.4 暗电流校正 ........................................... 16 3.5 波长校正 ............................................... 16 3.6 波长定位 ............................................... 16 3.7 附件设置 ............................................... 16 3.8 仪器初始化 ........................................... 17 3.9 仪器自检 ............................................... 18 3.10

本章小结 ............................................... 19

第4章 光度测量 ............................................... 20 4.1 光度测量简介 ....................................... 20 4.2 光度测量参数设置................................ 20 4.3 光度测量 ............................................... 23 4.4 结果保存与打印.................................... 23 4.5

本章小结 ............................................... 28

第5章 光谱扫描 ............................................... 29 5.1 光谱扫描简介 ....................................... 29 5.2 光谱扫描参数设置................................ 29 5.3 光谱扫描 ............................................... 30 5.4 查看光谱信息 ....................................... 30 5.5 保存和打开光谱文件 ............................ 31 5.6

本章小结 ............................................... 31

第6章 定量测定 ................................................ 32 6.1 定量测定简介 ........................................ 32 6.2 定量测定参数设置 ................................ 32 6.3 定量测定 ................................................ 36 6.4 保存测量文件 ........................................ 38 6.5

本章小结 ................................................ 38

第7章 时间扫描 ................................................ 39 7.1 时间扫描简介 ........................................ 39 7.2 时间扫描参数设置 ................................ 39 7.3 时间扫描 ................................................ 41 7.4 保存光谱文件 ........................................ 42 7.5 本章小结 ................................................ 42 第8章 DNA蛋白质测定 .............................. 43 8.1 DNA蛋白质测定功能的用途 .............. 43 8.2 启动DNA蛋白质测定功能 ................. 43 8.3 设置测量参数 ........................................ 44 8.4 处理测量结果 ........................................ 45 8.5

本章小节 ................................................ 45

第9章 图形处理 ................................................ 46 9.1 图形处理的用途 .................................... 46 9.2

分析扫描谱图 ........................................ 46

9.2.1

显示设置 ....................................... 46

9.2.2 一般性观察 ................................... 47 9.2.3 数学计算 ....................................... 50 9.2.4 3D图谱 .............................................. 52 9.3 本章小结 ................................................ 54

第10章 数据导出 ........................................... 55 10.1 数据导出简介 ........................................ 55 10.2 可导出的数据 ........................................ 55 10.3 数据导出 ................................................ 56 10.4 处理导出的数据文件 ............................ 57 10.5 本章小结 ................................................ 57 第11章 管理功能 ........................................... 58 11.1 管理功能介 ............................................ 58 11.2

用户管理 ................................................ 58

11.2.1 用户管理 ....................................... 59

11.2.2 组管理 ........................................... 60

11.3 11.4 11.5

安全参数 ............................................... 61 操作日志 ............................................... 62 其他管理功能 ....................................... 63

自定义日志 ................................... 63

11.5.2 锁定系统 ....................................... 63 11.6 本章小结 ............................................... 63

第12章

结束语 ............................................... 64

11.5.1

附录A 定量测定的应用方法 .............................. 66 多波长紫外分光光度法 .................................... 66 导数紫外吸收光谱法 ........................................ 75 附录B 产品介绍 .................................................. 78 TU-1901/1900紫外可见分光光度计 ............... 78 TU-1800PC/SPC紫外可见分光光度计............ 81 TU-1800/S紫外可见分光光度计 ..................... 84 TAS-986型原子吸收分光光度计 ..................... 88 TW-6000水质连续自动监测仪 ........................ 90 HUMAN系列超纯水器 ....................................... 91

第1章 软件的安装及配置

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:UVWin5.0软件的运行环境,如何将UVWin5.0安装到您的计算机中,如何使用配置程序来设置软件的外部参数。

具体包含以下内容: ? 安装UVWin5.0软件 ? 配置程序 ? 本章小结

1.1 安装UVWin5.0软件

UVWin5.0软件可运行于Microsoft Windows98/2000/XP。对于您计算机的硬件,最低需配要求800MHZ以上的CPU,64M以上的内存,以及CD-ROM或DVD-ROM驱动器。

推荐配置:Pentium1.4G CPU,256M内存,32M图形加速显示卡,17英寸彩色显示器,CD-ROM或DVD-ROM。以上配置中,图形加速显示卡的作用主要是为三维图谱做3D加速,因此,如果您对三维图谱的要求不高,则可以降低显示卡的要求,配备常规的图形显示卡即可。另外,UVWin5.0软件需要至少要占用20M的硬盘空间。因此,您需要保证您的硬盘有足够的空间来安装软件。

UVWin5.0软件的安装过程也是比较简单的。您只需要将安装光盘插入光驱,系统会自动运行安装引导程序(如果没有自动运行,运行光盘中的Install.exe文件即可)。如图 1-1所示。您只需要选择“运行UVWin5软件安装程序”即可进行安装。如错误!未找到引用源。所示。

图 1-1 安装引导程序

在安装过程中,您只需要根据系统提示进行安装即可。当安装程序提示您输入软件序列号时,您需要将附在软件包装盒中的序列号输入即可。在安装结束后,系统会提示您“安装MS Access数据库引擎”,如果您的系统中没有安装MS Office软件,则需要选择此选项来安装数据库引擎。另外,您还可以选择“运行UVWin配置程序”来对UVWin软件进行配置。有关配置程序的具体使用方法见1.2配置程序。

2 UVWin5.0使用指南

图 1-2 UVWin5.0安装画面

软件安装完成后,会在桌面上创建一个快捷方式。另外,还会在『开始』菜单的『程序』组中创建一个文件夹,文件夹中将包含UVWin5.0软件的快捷方式、配置程序的快捷方式、帮助文件的快捷方式以及卸载程序。另外,您还可以通过版本查看器来查看软件的版本。如图 1-3所示。

UVWin5.0桌面快捷方式 UVWin5.0程序组

图 1-3 UVWin5.0程序组及快捷方式

如果您需要将UVWin5.0从计算机中删除,可运行程序文件夹中的“卸载程序”,系统会自动将UVWin5.0软件从您的计算机中删除。需要注意的是,在删除软件之前,请把您需要保存的测量结果文件提前进行备份,以免造成数据丢失。

测量数据文件的默认文件夹是:“C:\\Program Files\\普析通用\\UVWin5 紫外软件\\Data”。您也可以根据UVWin5.0在桌面上的快捷方式来查找相应的文件夹。

第1章 软件的安装及配置 3

小技巧:“快捷方式”

如果您不知道快捷方式所指向的文件的具体位置,可以选中快捷方式,然后单击鼠标右键,在弹出的菜单中选择“属性”,即可打开快捷方式的属性窗口。在属性窗口中,单击“查找目标”,系统会自动打开资源管理器,并定位到快捷方式所指向的文件。

1.2 配置程序

UVWin5.0配置程序是设置UVWin5.0软件运行条件的工具软件。您可以通过选择『开始』?『程序』?『UVWin5.0的文件夹』?『UVWin5.0配置程序』来启动配置程序。配置程序的运行界面如图 1-4所示。

图 1-4 通讯端口设置

通讯端口选项卡

设置计算机与仪器连接所使用的端口名称。当您选择了一个端口后,单击“测试”按钮,系统将会显示此端口的状态。当显示状态正常时,表明此端口是可用端口。否则请更换其他端口。

附件选项卡

设置仪器所使用的附件类型。可供选择的类型有“八联池”、“五联池”、“固定样品池”、“固定流量池”和“积分球”。如图 1-5所示。您可以根据仪器的配备来进行选择。

图 1-5 附件设置

4 UVWin5.0使用指南

光谱带宽选项卡

设置固定狭缝仪器的光谱带宽值。如果您所购买的仪器是固定狭缝仪器,则可通过此项设置来设定仪器狭缝的光谱带宽值。如图 1-6所示。此值将随测量数据文件一同保存。同时,在打印输出时同样会用到此值。

图 1-6 固定狭缝的光谱带宽设置

帮助选项卡

在本页,您可以获得有关UVWin5.0配置程序使用方法的说明性文本。

当您完成了对UVWin5.0配置程序的设置工作后,可单击“确定”按钮将结果保存并退出。也可单击“应用”按钮将结果保存但并不退出。如果您想放弃设置,则可以单击“取消”按钮或直接将窗口关闭。如果您选择了“退出后运行UVWin”复选框,则在您“确定”退出后系统会自动调用UVWin5.0主程序。

1.3 本章小结

本章主要介绍了UVWin5.0软件的安装方法、运行环境以及配置程序的使用方法。值得注意的是,当您安装完软件后,应运行配置程序对软件运行参数进行设置。这样能够保证软件的顺利运行。

第2章 软件环境介绍

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:UVWin5.0的用户界面,菜单功能,环境参数的设置方法。

具体包含以下内容: ? 启动UVWin5.0

? 熟悉UVWin5.0的环境窗口 ? 设置UVWin5.0的运行环境 ? 本章小结

2.1 启动UVWin5.0

当您准备运行UVWin5.0软件时,需要确认紫外仪器与计算机的连接正常,并且已经打开主机电源。此时,可以点击UVWin5.0的快捷方式来启动软件。软件的启动画面如图 2-1所示。

图 2-1 UVWin5.0启动画面

如果此时仪器工作正常,则可进入仪器初始化画面。如图 2-2所示。(有关初始化的详细说明,请参阅3.1仪器性能。)

6 UVWin5.0 使用指南

图 2-2 UVWin5.0初始化

当初始化完成后,便可进入UVWin5.0的主用户界面了。但如果初始化失败,系统将显示提示信息,如图 2-3所示。选择“是”则可以进入系统,选择“否”则退出系统。需要引起注意的是,当初始化失败时,尽量不要进入系统对仪器进行其他操作。因为,初始化失败的原因是多种多样的,可能是仪器的某个部件出现问题,因此,一旦您对出现问题的部件进行操作,很有可能造成不必要的损失。所以,在初始化失败后,尽量能够做到先退出系统,然后查阅《仪器维修手册》或与维修服务人员联系。

图 2-3 初始化失败的提示信息

如果在启动UVWin5.0时,仪器工作不正常或与计算机的连接出现问题,则会造成无法联机的现象,并显示提示信息。如图 2-4所示。此时,您需要检查通讯电缆是否正确连接以及仪器的电源开关是否打开。另外,如果您设置的通讯端口有问题,也会造成上述现象。因此,您需要选择“终止”退出程序,然后运行UVWin5.0配置程序重新设置通讯端口,再重新启动UVWin5.0软件。(有关UVWin5.0配置程序的使用方法,请参阅1.2 配置程序)

选择“忽略”可脱机进入软件系统,但无法对仪器进行操作。

图 2-4 无法联机的提示信息

2.2 熟悉UVWin5.0的环境窗口

不论您用上一节所介绍的哪种方法启动并进入UVWin5.0系统,最终展现在您面前的是UVWin5.0的主界面窗口。如图 2-5所示。

第2章 软件环境介绍 7

工具栏 菜单栏 树形窗口 状态栏 模块窗口

图 2-5 UVWin5.0的主界面窗口

主界面窗口采用多文档树形视图结构的布局方式。这种布局方式不但结构工整、美观,且方便用户操作。从上图可以看出,UVWin5.0的主界面窗口包含如下一些组成部分:菜单栏、工具栏、状态栏、树形窗口和模块窗口。下面将为您介绍这些组成部分。 菜单栏

菜单对于大多数软件来说都是必不可少的,UVWin5.0也不例外。软件中的大部分功能都是由菜单栏提供的。菜单栏包含如下一些主菜单:文件、编辑、测量、图形、数学计算、管理、工具、应用、窗口和帮助。如图 2-6所示。您可以通过菜单栏提供的菜单功能来完成软件中相应的设置。本书会在后面的章节中结合软件功能来介绍菜单功能。

图 2-6 UVWin5.0的菜单栏

小知识:“快捷键”

在Windows系统中,打开菜单可以有很多种方法。除了使用鼠标进行点击外,还可以按住Alt键,然后按菜单文字中带有下划线的字母。例如,对于“文件(A)”菜单,可按Alt+A键即可打开文件菜单。另外,在有的菜单中,其标题文字的后面会标有一些特殊的标记,例如,“打印(P) Ctrl+P”或“参数设置… F4”等,其中的“Ctrl+O”和”F4”其实是相应菜单的快捷键,您只需要按指定的快捷键,即可调用相应菜单的功能。所以,对于“打印(P) Ctrl+P”菜单来说,只需要按住Ctrl键再按以下P键即可。 工具栏

工具栏的作用是将菜单中常用的功能以工具按钮的方式进行集中处理。这样,用户就可以通过一次单击这些工具按钮来完成菜单中的功能,省去了那些繁琐的菜单操作。UVWin5.0软件中的工

8 UVWin5.0 使用指南

具栏由以下几部分组成:“常规”工具栏、“配置”工具栏、“窗口”工具栏、“图形”工具栏、“控制”工具栏和“工具”工具栏。如图 2-7所示。每个工具栏之间有一条分割线,当鼠标移动到分割线上时,鼠标指针将变成“”形状。这时,可以按住鼠标左键不放,拖动这条分割线,从而拖动工具栏,使其改变位置。如图 2-8所示。

“常规”工具栏 “配置”工具栏 “窗口”工具栏

“控制”工具栏 “图形”工具栏 “工具”工具栏 图 2-7 UVWin5.0的工具栏

工具栏分割线

图 2-8 拖动中的工具栏

状态栏

状态栏位于整个窗口的底部,负责显示软件中的一些状态信息。例如,指令执行的状态、数据

文件类型、当前用户名、文件调用进度等信息。在光谱扫描和时间扫描窗口下,还可以显示当前鼠标所在的实际坐标值。如所示。另外,如果您的主界面窗口没有被最大化,则在状态栏的右下角将会出现“”标记,您可以使用鼠标拖动此标记来改变主界面窗口的大小。

当前坐标 数据文件类型 当前用户 联机状态

图 2-9 UVWin5.0状态栏

树形窗口

树形窗口是在软件设计领域中比较常用和实用的一种结构方式。其特点是直观、方便并且结构清晰。在UVWin5.0中,共有两个树形窗口,一个负责显示当前各个功能模块的文件和工作室,称为“工作室窗口”。另外一个负责显示和控制当前仪器的附件(有关仪器附件的内容,请参见3.7附件设置),称为“附件窗口”。如图 2-10所示。有关“附件窗口”的详细使用方法,将在以下章节进行介绍。

第2章 软件环境介绍 9

工作室窗口 附件窗口

图 2-10 工作室窗口(上)和附件窗口(下)

模块窗口

模块窗口实际就是主界面窗口中的子窗口。称其为模块,其实就是每个窗口可以完成不同的测量功能。模块窗口包括:光度测量窗口、光谱扫描窗口、定量测定窗口和时间扫描窗口。如图 2-11所示。您可以使用鼠标点击窗口的标题栏来激活窗口,还可以通过选择“工作室”窗口中相应的模块名称来激活各个模块窗口。

图 2-11 模块窗口

小知识:“窗口”

在Windows系统中,几乎所有的信息全部用“窗口”表示。这里的“窗口”,不单单指带有标题栏并可以拖动位置和改变大小的窗口,而是指所有能够显示信息的面版。例如,资源管理器是一个标准的窗口,而资源管理器中的工具栏也是一个窗口,只不过工具栏窗口是隶属于资源管理器的主窗口的。因此,工具栏窗口就被称为资源管理器的一个的“子”窗口,而资源管理器就被称为是“父”窗口。同样,工具栏中的工具按钮也是一个窗口,而它的“父”窗口则是工具栏。资源管理器是一个单文档的程序,因此,其“子”窗口只能放置在固定的位置,或进行简单的移动。而对于多文档的程序,则可以将一个或几个“子”窗口设置成为一个标准的窗口,这样,就可以向“父”窗口那样拖动、改变大小,同时也拥有自己的标题栏。当然,

第3章 软件的安装及配置 15

0.2 nm、0.5nm、1.0nm、2.0nm和5.0nm。对于固定狭缝仪器,则无须设置此参数。如果要改变固定狭缝仪器的光谱带宽值,请参阅1.2 配置程序。

? 响应时间

设置仪器采样的响应时间。时间越长,采集的数据越准确。此参数只针对与常规紫外仪器,快速紫外无此参数。

? 换灯波长

设置仪器切换氘灯与钨灯的波长界限。小于此波长的将被认为是紫外区,仪器自动切换为氘灯。大于此波长的被认为是可见区,仪器自动切换为钨灯。此参数只针对与常规紫外仪器,快速紫外无此参数。

3.2 能量设置

对于紫外可见分光光度计来说,测光方式一般是吸光度(Abs)和透过率(T%)两种方式,但有些时候也需要运用能量方式来对测试样品进行能量分布的分析测量。因此就需要将测光方式设置成为能量方式。对于能量方式,就需要进行一些特殊的设置工作。当您选择了能量方式后,可选择【测量】菜单下的【能量】子菜单或点击工具按钮

,即可打开能量设置窗口。如图 3-2所示。

图 3-2 能量设置窗口

? 能量灯

设置能量方式下所使用的光源。对于常规紫外来说,可设置氘灯和钨灯。对于TU-1600系列仪器来说,由于其使用透射式氘灯,因此无须设置能量灯。

小知识:“透射式氘灯”

透射式氘灯是一种新兴的光源技术,其原理是在普通氘灯的灯心上开孔,使其他光源的光线能够通过此孔,从而达到对光路的统一。运用此项技术,可省取老式光源中的光源反射镜,将钨灯与氘灯前后排列即可。

? 增益

设置能量方式下的增益值。增益值的范围会根据仪器型号的不同而不同。例如,TU-1800SPC的增益范围是0~15共16挡。而TU-1660的增益范围则是1~6共6挡。增益的作用是对测量数据进行放大,从而能够对能量分布较弱的光谱进行观察和测量。但增益的放大也会影响数据的质量,也就是说,增益越大,数据信号的噪声也就越大。反映到光谱图上,就是图形的锯齿变大了。测量的数据也就相对不准确了。

能量设置完成后,可点击“确定”按钮或“执行”按钮,系统会立即更新能量参数。

16 UVWin5.0 使用指南

3.3 基线校正

基线校正是紫外可见分光光度计的一项校正功能。此功能是在吸光度或透过率测光方式下进行的。同时,也是光谱扫描所特有的校正功能。由于这两种测光方式的计算方法要求对空白溶液或溶剂进行校正,因此,在扫描之前,需要进行基线校正。并且,在您更改完扫描参数后,也需要重新进行基线校正。

3.4 暗电流校正

暗电流校正是对仪器的电路噪声进行校正。因此,您需要将黑挡块插入样品池,然后在进行暗电流校正。这样,才能够达到校正的效果。

3.5 波长校正

波长校正是对仪器的波长准确度进行校正。由于紫外可见分光光度计对波长精度的要求较高,一旦波长出现大的偏差,将会直接影响测量结果。但由于仪器的结构和原理,波长出现偏差再所难免,因此就需要利用波长校正功能对波长进行校正。

3.6 波长定位

波长定位是将仪器的当前波长定位到您设置的位置。选择【测量】菜单下的【波长定位】子菜单,即可打开波长定位窗口。如图 3-3所示。在窗口中,输入需要定位的波长值,按“确定”键即可。

图 3-3 波长定位

3.7 附件设置

附件设置允许你对仪器所使用的附件进行设置。目前在软件中可设置的附件包括:固定样品池、流量池、积分球、五联池和八联池。选择【测量】菜单下的【附件】子菜单,即可打开附件设置窗口。如图 3-4所示。在此窗口中,您可以选择相应的附件类型,并对样品类型进行设置。如果您选择了多联池,则可以点击“位置”,将相应的样品池选择为“”,从而设置当前样品池的位置。

第3章 软件的安装及配置 17

图 3-4 附件设置窗口

类型

对应样品池的样品的类型。如果设置为“空白”样品,则在进行基线校正时系统会自动切换到此样品池进行校正。如果设置为“未使用”,则在测量过程中不切换此样品池。 样品名

设置对应样品池的样品的名称。此名称会随测量文件一同保存,并可打印输出。

3.8 仪器初始化

选择【测量】菜单下的【初始化】子菜单,即可对仪器重新初始化。如图 3-5所示。在初始化画面中,UVWin5.0将对仪器的一些工作机构进行初始化工作。工作机构会根据仪器型号的不同而不同。例如,可变狭缝的仪器将初始化狭缝电机,而固定狭缝的仪器没有狭缝电机,因此无须初始化。UVWin5.0初始化画面将占用整个屏幕。背景将显示一些关于公司的信息。在初始化窗口中,将显示仪器名称、仪器编号以及初始化项目。在初始化过程中,成功的项目将显示“”标记,失败的项目将显示“”标记。对初始化失败原因及故障排除的详细说明,请参阅仪器的维修手册。

图 3-5 仪器初始化

18 UVWin5.0 使用指南

3.9 仪器自检

仪器自检将帮助您自动完成对仪器性能指标的自检工作。选择【测量】菜单下的【仪器自检】子菜单,即可打开仪器自检选项窗口。如图 3-6所示。

图 3-6 仪器自检设置窗口

仪器自检项目共六个,分别是:【波长准确度】、【光度准确度】、【杂散光】、【噪声】、【基线平直度】和【稳定性】。您可以对各个项目进行设置和选择。 波长准确度

利用【钬玻璃】和【氘灯】的特征谱线来测定仪器的波长准确度。您可以点击【设置】按钮来对特征波长进行细微的修改。 光度准确度

利用【中密度滤色片】和【重铬酸钾溶液】的特征谱线对仪器的光度准确度进行测定。您同样可以点击【设置】按钮来对特征谱线的吸光度值进行细微的修改。

第3章 软件的安装及配置 19

杂散光

利用【亚硝酸钠】和【碘化钠】溶液对仪器的杂散光进行测定。 噪声

对仪器的120秒钟的噪声进行测定。 基线平直度

对仪器的极限平直度进行测定。 稳定性

对仪器的稳定性进行测定。您可以选择【一小时】或【半小时】测定。

如果您不想进行某项自检,可以取消将此项前的选择框。当您设置完自检参数后,可点击【确定】按钮,系统会根据您设置的内容组织自检向导,您可在向导的提示下完成仪器的自检过程。如图 3-7所示。

图 3-7 仪器自检向导

如果您的仪器支持多联样品池附件,可在向导的第一页设置【自动自检】功能。并对相应的样品设置样品池位置。点击【下一步】系统将自动开始自检。如果您未选择自动自检,则需要一步一步的进行自检过程。在自检过程中,系统会将自检不合格的项目进行标记。在自检向导的最后一页,您可以点击【打印结果报告】按钮对自检结果进行打印输出。打印输出时,系统会将每项自检项目的数据和结果进行不同的标记。自检通过的项目系统将给予“?”标记,否则无此标记。

3.10 本章小结

本章主要向您讲述了如何通过UVWin5.0软件提供的功能来操纵仪器。相信阅读完本章后,您一定对软件操纵仪器的方式有了一定的了解。希望您能够配合仪器的使用来逐渐学习软件的使用方法。

第4章 光度测量

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:什么叫做光度测量,如何设置光度测量的参数,如何进行光度测量,如何保存和打印测量结果。

具体包含以下内容: ? 光度测量简介 ? 光度测量参数设置 ? 光度测量

? 结果保存与打印 ? 本章小结

4.1 光度测量简介

“光度测量”是指在您指定的波长处读取数据测量数据。也就是我们常说定点读数。在

UVWin5.0中,您可以指定多个波长点进行光度测量,并且还可以对测量数据进行简单的数学计算。具体的设置方法见下节。

4.2 光度测量参数设置

激活光度测量窗口,选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单。即可打开光度测量设置窗口。如图 4-1所示。窗口中共有五个选项卡,您可以根据不同的需要进行设置。

图 4-1 光度测量参数设置窗口(测量选项卡)

第4章 软件的安装及配置 21

测量选项卡

? 测量波长

在测量选项卡中,您可以在【波长】编辑框中输入需要测量的波长点,然后点击【添加】按钮,即可在下面的波长点列表中添加一个测量波长点,测量波长点最多可设置26个,最少需要设置一个。如果需要删除波长点或清除波长类表,可点击【删除】按钮和【清除】按钮。当您在波长列表中选择了一个波长后,波长编辑框中同样会显示此波长,这时,您可以修改此波长,然后点击【修改】按钮,即可修改波长列表中相应的内容。

? 重复测量

光度测量允许您对测量重复次数进行选择。如果您不希望重复测量,可选择【重复测量】中的【无】。如果需要手动重复测量,可选择【手动】,然后在【重复次数】编辑框中输入需要重复的次数。【自动重复】的功能与手动重复类似,都是进行重复测量,但自动重复可自动完成多次重复测量,无须每次都去按测量键。但自动测量需要指定一个测量【时间间隔】,也就是每次测量之间所停顿的时间。此时间可以是零,也就是不停顿的连续测量。如果您选择了自动重复测量,还可以选择【根据样品池数量自动重复测量】,此选项的功能是将样品池中所有的样品自动测量一次。因此,无须指定重复次数,重复次数选项将被禁止。如果您所设置的样品池是固定样品池,则无法设置此选项。归根结底,重复测量的目的其实主要是进行平均值的计算,因此,您可以选择【计算平均值】将平均值计算功能打开。这样,在每次重复测量结束后,系统会自动计算平均值并显示在测量表格中。

? 光度模式

光度模式是指仪器当前运行的模式,可供选择的光度模式有:Abs(吸光度模式)、T%(透过率模式)、Es(能量模式-样品光)、Er(能量模式-参比光)、R%(参比光透过率-积分球附件专用)。

? 启始编号

设置样品编号中的启始数字。可输入任意数字。 简单计算选项卡

简单计算对测量结果的计算提供了很大的方便。利用此功能,您可以计算出一些比较专业的数据和分析结果。设置画面如图 4-2所示。您可以选择【启用简单计算】选项来开启简单计算功能。

图 4-2 光度测量设置窗口(简单计算选项卡)

22 UVWin5.0 使用指南

? 计算公式

在【计算公式】编辑框中,您可以输入需要进行结果运算的公式。在公式中,A、B、C、D……代表对应的波长点的测量数据。例如,您在测量选项卡的波长列表中输入了两个波长,分别是600nm和500nm,当您要计算这两个波长的测量数据的比值时,可以在简单计算选项卡的计算公式编辑框中输入A/B,然后点击【添加】按钮即可。计算公式默认的标题是“结果1”、“结果2”……。如果您指定标题,可在输入计算公式的同时,在【标题】编辑框中输入相应的标题即可。如果要修改某个公式,可在公式列表中选择相应的公式,在公式编辑框中修改其内容,然后点击【修改】按钮即可。如果要删除或清除公式列表的内容,可以点击【删除】和【清除】按钮。计算公式最多可输入十个。

? 符号

【符号】的作用其实就是模仿键盘的输入,点击符号按钮,就等于输入了对应的符号。 ? 显示

【显示】选项的作用是为计算公式提供不同的显示方式。下拉框共有两个选择,分别是:公式和标题。“公式”表示在测量结果表格中,计算公式将以公式的形式进行显示。“标题”则会以默认标题或用户设置的标题进行显示。

仪器选项卡

仪器选项卡的内容与仪器性能窗口的内容完全一致,请参阅3.1仪器性能。

附件选项卡

附件选项卡的内容与附件设置窗口的内容完全一致,请参阅3.7附件设置。

质量控制

一提到质量,也许您会想到某某产品的质量如何如何。例如,您购买了某某厂家的一台仪器,但没过多久仪器就坏了,您可以认为仪器的质量不好。因为您的判断标准是:一台新仪器在短时间内出现问题就是质量不好。不错,质量是用来形容商品好坏的,但质量也可以用来形容数据的好坏。例如,您测量了一个数据,其数值是0.1,但对于正常的测量来说,这个结果应该是1左右,最多不能少于0.8。很显然,这个测量结果是不正确的,或者说是不符合要求的。当然,也可以说这个数据的质量不好。因为您的判断标准是:最多不能少于0.8。

质量控制是UVWin5.0中新推出的一项功能。此功能的作用是对测量数据进行质量监控,一旦出现异常数据,系统会立即进行提示或按照预先设置的动作进行处理。当然,对数据的判断方法是可以设置的。如图 4-3所示。

图 4-3 质量控制设置窗口

第4章 软件的安装及配置 23

在质量控制窗口中,您可以通过【启用质量控制功能】选项来设置质量控制的开关。 ? 质量控制列表

设置质量控制的项目。A、B、C、D…表示测量波长点,结果1、结果2、结果3…表示计算结果。点击【全选】按钮可选中所有的项目,点击【反选】按钮可反选所有的项目,点击【清除】按钮可清除所有的选择。

? 限定

在限定框中,您可以输入对选择的项目所控制的【上限值】和【下限值】。【超限处理】可设置超上限或下限时系统做出的动作。可选的动作有:【继续】-继续进行测量;【停止】-停止测量;【重新测量】-重新对当前样品进行测量。如果您需要在测量表格中对超限结果进行标记,可点击【标记】按钮对标记进行设置。如图 4-4所示。

图 4-4 质量标记 标记表格(左)标记文本(右)

选择【开启】可开启标记功能。在【方式】框中,您可以选择对超限数据的标记方式。【标记表格】是将数据所在的表格进行标记。可选的标记可在【表格】下拉框中进行选择。如果您选择了【标记文本】,则可以对文本的字体、颜色进行设置。

? 第二次超限处理 【第二次超限处理】是指连续两次超限时系统所做出的动作。可选的动作有【继续】和【停止】。

4.3 光度测量

光度测量的测量过程非常简单,只需要点击“”按钮即可完成一次测量。测量结果将被显示在测量表格中。如果您想删除某个测量结果,可使用鼠标点击此结果,然后选择【编辑】菜单下的【删除】子菜单,即可将结果删除。如果需要恢复被删除的结果,可在测量表格上点击鼠标右键,在弹出菜单中选择【删除】菜单下的【撤消删除】子菜单,即可恢复被删除的测量结果。如果你要隐藏被删除的结果,取消【删除】菜单下的【显示删除的样品】的选择即可。

4.4 结果保存与打印

对于测量结果,既可以保存为文件,也可以打印输出。当您完成了分析测量后,可选择【文件】菜单下的【保存】子菜单,或点击“”按钮,系统会弹出保存文件窗口,如图 4-5所示。输入您需要保存的文件名,点击【保存】按钮,即可将文件保存到指定的位置。

24 UVWin5.0 使用指南

图 4-5 保存文件窗口

在窗口的底部,将显示当前的分析员。点击【注释】按钮可对测量结果进行注释。如图 4-6所示。

图 4-6 注释窗口

您可以在【样品名】编辑框中输入测量样品的名称,在【注释】编辑框中输入对测量结果的注释信息。以上信息将被保存到测量文件中,可供今后查阅。

如果要将测量结果打印输出,可选择【文件】菜单下的【打印】子菜单,或点击“”按钮,即可将测量结果打印输出。当然,您首先要保证您的计算机中已经安装了打印机。如果未安装打印机,系统将会提示错误信息。另外,如果您要修改打印输出的格式,可选择【文件】菜单下的【页面设置】子菜单,或点击“”按钮,即可打开页面设置窗口。如图 4-7所示。

第4章 软件的安装及配置 25

图 4-7 页面设置窗口

页边距选项卡

页边距选项卡中的内容主要是设置与距离有关的参数。如上图所示。首先,您可以选择页边距的【单位】,可选单位有【英寸】和【厘米】两种。然后,您可以在【页边距】框中输入页面的上、下、左、右四个边距值。也就是正文距纸边的距离。【距页边】框可以设置【页眉】和【页脚】距离纸边的距离。 板式选项卡

板式选项卡中的内容主要是设置页面输出的格式、字体、表格以及纸张的方向等。如图 4-8所示。

? 文本

设置文本打印的格式。可选的格式有【常规】、【简单表格】和【表格】。“常规”是直接将文本打印输出,不加任何的修饰。“简单表格”是在分类标题下面增加一条下划线,使标题更加突出。“表格”是按照表格的方式打印输出。另外,您还可以通过可点击【字体】按钮来设置打印字体。

? 行距

设置每行文本之间的距离。可选的行距有【最小行距】、【半个字符】、【一个字符】、【1.5个字符】和【两个字符】。

? 线宽

表格线的粗细程度。可选的线宽有【细线】和【粗线】。 ? 日期/时间格式

设置打印输出时期时间时所使用的格式。可选的格式有【XXXX年XX月XX日 时:分:秒】、【年-月-日 时:分:秒】、【年-月-日】和【时:分:秒】。除了第一个以外,其他的日期格式的年份均为两位数字。

26 UVWin5.0 使用指南

? 页码格式

设置打印页码的格式。可选的页码格式有【1,2,3…】、【-1-,-2-,-3-…】、【<1>,<2>,<3>…】和【(1),(2),(3)…】。这几种格式代表的分别是:直接打印页码编号、将页码编号的两边加上横线、将页码编号的两边加上尖括号、将页码编号的两边加上圆括号。

? 方向

设置打印纸的方向是【垂直】打印还是【水平】打印。

图 4-8 版式选项卡

页眉页脚选项卡

页眉与页脚的设置方法是相同的,只不过页眉将被打印到正文的上方,而页脚将被打印到正文的下方。对于页眉和页脚来说,还可以选择三个不同的位置进行打印输出。如图 4-9和所示。

图 4-9 页眉(左)页脚(右)设置

第4章 软件的安装及配置 27

? 左、中、右 【左】、【中】、【右】分别代表页眉或页脚的左、中、右三部分。您可以选择下拉框中的选项对打印内容进行设置。可设置的内容包括:

【无】:不打印任何文字。 【日期/时间】:打印当前的日期和时间。日期时间格式可以在【版式】选项卡中设置。 【文件名】:测量文件的文件名。 【模块名称】:当前分析测量的模块的名称。例如,光度测量、光谱扫描等。 【仪器名称/编号】:当前仪器的名称以及编号。例如,TU-1901/01-1901-01-0001。 【分析员】:当前登陆的用户名。 【公司(单位)】:当前用户的公司名称。 【页码】:当前页码。 【自定义】:自定义文本。如果您选择了此选项,在下拉框的下方会出现一个编辑框,您可以在此编辑框中输入自定义的文字。

如果您选择了相应的内容,可通过点击【字体】按钮来设置不同的字体。另外,您还可以通过选择【分割线】在页眉、页脚与正文之间增加分割线。

图 4-10 打印参数设置

打印参数选项卡

打印参数选项卡允许您选择打印输出时的固定参数。可选的参数有【仪器性能】参数和【分析记录】参数。仪器性能包含仪器的名称、编号、光谱带宽等信息。分析记录包含分析员、样品名和注释等信息。您可以根据不同的需要进行选择。

如果您观看一下页面设置的效果或想预览一下打印的结果,可选择【文件】菜单下的【打印预览】

28 UVWin5.0 使用指南

子菜单,或点击“

”按钮,即可进行打印预览。如图 4-11所示。

图 4-11 打印预览窗口

在打印预览窗口中,可以点击“”和“印输出。点击“”可进行页面设置。

”按钮对窗口进行放缩。点击“”按钮将立即打

4.5 本章小结

本章主要向您介绍了光度测量中的一些设置方法和测量方法。另外,还着重介绍了有关打印设置和打印预览的一些功能,这些功能在软件的其他地方是可以共用的,因此,在后面的章节中涉及到打印的内容将不在详细论述。

第5章 光谱扫描

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:什么叫做光谱扫描,如何设置光谱扫描的参数,如何进行光谱扫描,如何查看光谱信息,如何保存和打开光谱文件。

具体包含以下内容: ? 光谱扫描简介 ? 光谱扫描参数设置 ? 光谱扫描 ? 查看光谱信息

? 保存和打开光谱文件 ? 本章小结

5.1 光谱扫描简介

光谱扫描是指按照一定的波长间隔,对某个波段范围进行扫描。在扫描过程中,波长每变化一次,就读取一次测量数据,并将测量数据以二维图形的方式进行显示,从而进行进一步的分析与研究。光谱扫描大多用在对样品的定性分析上,由于其直观的图形显示方式,使操作者对样品的性状一目了然,因此,是紫外可见分光光度计必不可少的一项重要功能。

5.2 光谱扫描参数设置

如果您需要进行光谱扫描,那么,首先需要对扫描参数进行设置。激活光谱扫描窗口,选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单,或点击“”按钮,即可打开设置窗口。如图 5-1所示。

图 5-1 光谱扫描参数设置

30 UVWin5.0 使用指南

窗口中共有三个选项卡,分别是:【测量】、【仪器】和【附件】。其中,测量选项卡中的内容是设置扫描参数的主要内容,另外两个选项卡的内容与仪器性能和附件设置窗口中的内容完全相同。有关仪器性能和附件设置窗口的内容,请参阅3.1仪器性能和3.7附件设置,在这里就不再重复论述了。下面着重介绍光谱扫描参数的设置方法。 光谱扫描光度模式

设置光谱扫描的【光度模式】。光度模式是指仪器当前运行的模式,可供选择的光度模式有:Abs(吸光度模式)、T%(透过率模式)、Es(能量模式-样品光)、Er(能量模式-参比光)、R%(参比光透过率-积分球附件专用)。如果您选择了能量方式(Er、Es),还可以点击【能量】按钮对能量参数进行设置。 显示范围

设置光谱扫描图形中纵坐标的范围。您可以在【最大】和【最小】编辑框中输入相应的数值。 扫描参数

设置扫描的波长范围、间隔、速度等参数。【起点】和【终点】构成了扫描范围。【速度】表示扫描速度。扫描速度越快,数据的质量相对越不好;扫描速度慢,数据的质量相对越好。【间隔】表示扫描的波长间隔。也就是间隔多少纳米采一次样。可选的扫描间隔有:0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和5.0nm。【自动间隔】的作用是根据您设置的扫描范围来为您自动选择一个扫描间隔。 扫描方式

扫描方式是设置光谱扫描的重复扫描方式。【单次扫描】表示只进行一次扫描,不重复。【重复扫描】表示可进行多次重复扫描。【自动扫描】是根据您选择的附件样品池的数量进行扫描。如果您选择了重复扫描,则需要设置扫描的【时间间隔】和【重复次数】。如果您选择了自动扫描,则不需要设置重复次数,只要设置时间间隔就可以了。

5.3 光谱扫描

选择【测量】菜单下的【开始】子菜单,或点击“”按钮,即可开始光谱扫描。在扫描过程中,系统会将扫描的数据和波长以图形的方式动态绘制在光谱扫描窗口中,另外,还会将数据显示在工具栏中。如果您要终止扫描,可点击“停止”按钮或按ESC键。

5.4 查看光谱信息

选择【图形】菜单下的【光谱信息】子菜单,或点击“”按钮,即可打开光谱信息窗口。如图 5-2所示。在此窗口中,所有扫描的光谱将以列表的形式进行显示。您可以任意点击一条光谱,在其右侧的详细信息窗口中将会显示其详细信息。您还可以点击“颜色”按钮来改变对应光谱的颜色。

图 5-2 光谱信息窗口

第5章 光谱扫描 31 5.5 保存和打开光谱文件

如果您想保存扫描光谱,可选择【文件】菜单下的【保存】子菜单,或点击“”按钮,在弹出的保存窗口中输入要保存的文件名,然后点击【确定】按钮即可。当您要浏览保存过的光谱文件时,可选择【文件】菜单下的【打开】子菜单,或点击“”按钮,此时系统将弹出打开光谱文件窗口。如图 5-3所示。

图 5-3 打开光谱文件窗口

在此窗口中,您可以选择需要打开的光谱文件。右侧的谱图为预览窗口。点击【属性】按钮可以查看光谱文件的详细信息。

5.6 本章小结

本章主要讲述了UVWin5.0中有关光谱扫描的一些内容。相信您对光谱扫描的使用方法已经有了一定的了解。希望您能够结合仪器的使用逐渐熟悉软件的使用方法。

第6章 定量测定

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:什么叫做定量测定,如何设置定量测定的参数,如何进行定量测定,如何保存测量文件。

具体包含以下内容: ? 定量测定简介 ? 定量测定参数设置 ? 定量测定 ? 保存测量文件 ? 本章小结

6.1 定量测定简介

定量测定是用待测样品的测量值与标准样品的测量值进行比对,最后计算出待测样品的浓度值的一种测定方法。定量测定可分为单波长定量、双波长定量、三波长定量、一次微分定量、二次微分定量、三次微分定量等诸多的测量方法。

6.2 定量测定参数设置

激活定量测定窗口,选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单,或点击“”按钮,即可打开定量测定设置窗口。如图 6-1所示。

图 6-1 定量测定参数设置

第6章 定量测定 33

窗口共有五个选项卡,分别是:【测量】、【校正曲线】、【仪器】、【附件】和【质量控制】。其中,仪器和附件的内容与仪器性能和附件设置窗口的内容完全一致,请参阅3.1仪器性能和3.7附件设置。 测量选项卡

测量选项卡主要提供定量测定的方法设置、波长设置和重复测量设置等。您可以选择不同的测量方法来完成不同的定量要求。同时还可以设置样品编号和测量重复次数。如上图所示。

? 测量方法

设置定量测定的测量方法。可选的测量方法有:【单波长法】、【双波长法】、【双波长系数法】、【三波长法】、【一次微分法】、【二次微分法】、【三次微分法】和【四次微分法】。您可以根据不同的测试要求对方法进行选择。如果您选择了单波长法,则需要在【主波长】编辑框中输入测定波长。如果您选择了双波长或三波长法,则需要在【基线波长1】和【基线波长2】编辑框中输入基线波长。有关定量测定方法的详细介绍,请参阅 附录A 定量测定的应用方法。

? 样品编号

设置标准样品和未知样品的标识名称及编号。 ? 其他设置

在其他设置中,您可以设置对样品进行重复测量。重复测量是对一个样品进行多次测量,然后取多次测量结果的平均值进行含量计算。因此,如果您选择了【重复测量】选项,还需要在【重复次数】编辑框中输入需要重复测量的次数,这样才能够达到重复测量的目的。重复测量可使测量的数据更为准确,但测量所花费的时间要比正常测量梢长一些。另外,如果您的仪器配有多联样品池,您还可以选择【自动切换样品池】选项。这样,系统会每测量一个样品就自动切换到下一个样品池,您只需要将样品按照顺序放置与样品池中即可。

校正曲线选项卡

校正曲线选项卡允许您对校正曲线的参数进行设置。可设置的参数包括:【曲线方程】、【方程次数】、【浓度单位】、【零点插入】、【曲线评估】、【校正方法】等。如所示。

图 6-2 校正曲线设置

34 UVWin5.0 使用指南

? 曲线方程

设置校正曲线所使用的方程。可选的方程有两个,分别是:C=f(Abs)和Abs=f(C)。前者是以吸光度做为变化量来求解浓度值。而后者是前者的反函数,主要用于吸收系数的计算。

? 方程次数

方程次数表示校正曲线所使用的方程的次数,也可以称为阶数。就是我们常说的“一元二次方程”、“一元三次方程”中的“二次”和“三次”,主要是指方程中变化量的最高次数。可选的方程次数有:【一次】、【二次】、【三次】和【四次】。其中,一次方程也可以称“线性方程”,其他的则称为“非线性方程”。由于紫外可见分光光度计的测光准确度和重复性都比较好,在允许的吸光度范围内其测量的数据与浓度值基本程线性变化,因此,线性方程应用得比较广泛。您可以根据实际情况来对曲线方程进行选择。如图 6-3和图 6-4所示。

图 6-3 线性校正曲线

图 6-4 非线性校正曲线

第6章 定量测定 35

? 浓度单位

设置样品系列的浓度单位。默认的浓度单位有:【ηg/μl】、【ηg/ml】、【μg/μl】、【μg/ml】、【mg/l】、【ppb】、【ppm】和【mol/l】。如果没有您所需要的浓度单位,您还可以手工输入一个浓度单位。

? 零点插入

【零点插入】是在第一个标准样品前插入一个浓度和吸光度都是零的标准样品,并参加曲线拟和运算。

? 曲线评估

曲线评估是对校正曲线的质量(也就是我们常说的相关系数)进行评估。评估结果会显示在定量测定窗口的参数窗口中。如果您需要对校正曲线进行评估,可将【曲线评估】选项设置为【R2】(相关系数),然后点击【设置按钮】,系统将弹出曲线评估设置窗口。如图 6-5所示。

图 6-5 校正曲线评估设置

在设置窗口中,您可以将【评估值】和【正偏差】设置为1.0和0.0,因为校正曲线的相关性是以百分比来表示的,因此应以100%做为评估值。并且,相关性是不会大于100%的,因此,就不会产生正偏差。所以,正偏差可设置为0.0。【负偏差】是指在评估值的基础上允许允许产生的负偏差。例如,您可以将负偏差设置为0.001,这就说明,您的评估下限是1.0-0.001=0.999,您的评估范围则是1.0~0.999。超出此范围的数值将被认为是不合格的数值。用一句俗话说就是“不能少于三个9” 。 【显示符号】用于对评估的结果进行显示,【偏移数量】是指显示符号的数量。例如,您将评估值设置为1.0,将正偏差设置为1.5,将负偏差设置为0.5,将显示符号设置为“*”,将偏移数量设置为5。这时,如果您对0.5进行评估,则会得到1个“*”,对1.0进行评估,则会得到5个“*”。这是由于,您将偏移数量设置为5,就表明将正偏差与评估值的差值和负偏差与评估值的差值都平均分成了5段,每段用一个“*”表示。如下所示。

0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5

* * * * * * * * * *

评估的过程是这样的:先判断被评估的数值相对于评估值是属于正偏差还是负偏差。也就是说,比评估值大的数值属于正偏差,比评估值小的数值属于负偏差。当确定好正、负偏差后,就开始进行判断。判断的过程其实就是看被评估的数值距评估值有多近,越近,得到的“*”就越多。例如,结合上图对0.85进行评估的过程是这样的:判断0.8是属于负偏差,则应以0.5~1.0为评估范围。首先,判断0.85是否在0.5和0.6之,如果不是,则增加一个“*”,再判断是否在0.6与0.7之间,

36 UVWin5.0 使用指南

如果不是,又增加一个“*”,依次类推。等判断到0.8与0.9时就结束了,因为0.85是在0.8与0.9之间。至此,总共得到了四颗“*”。当然,整个判断过程是由系统自动完成的,无须进行任何的外部计算。您也不必关心细节,只要了解曲线评估的基本功能就可以了。也就是得到的“*”越多,证明曲线的相关性就越好。当然,这些“*”将被显示在定量测定的参数窗口中,并在您打印校正曲线是一同打印输出。

? 校正方法

校正方法共分为两种,分别是:【浓度法】和【系数法】。浓度法要求您输入标准溶液的浓度,然后对标准溶液进行吸光度测量,得到测量数值后,与输入的浓度进行曲线拟和并计算出方程的系数与相关性。而系数法则要求您直接输入方程的各项系数,不用进行标准样品的测量。例如,如果您将方程次数设置为二次,同时选择了系数法,则需要输入三个方程系数,即:K0、K1、K2。K0表示常数项,K1表示一次项系数,K2表示二次项系数。 质量控制选项卡

质量控制功能的使用方法与光度测量中质量控制的使用方法完全一致,请参阅4.2光度测量参数设置。

6.3 定量测定

定量测定窗口共分为四个部分,即:【标准样品表格】、【未知样品表格】、【校正曲线】和【参数列表】。如图 6-6所示。

校正曲线 标准样品表格 参数列表 样品表格

图 6-6 定量测定窗口

测量表格

标准样品表格负责显示标准样品的测量结果。一般情况下,表格共有八列,分别是:【序号】、【编号】、【类型】、【浓度】、【吸光度】、【测定波长的吸光度】、【标准偏差】和【相对标准偏差】。如果您使用双波长法或三波长法,表格中还将显示其他测量波长的数值。

? 【序号】:表示样品数量。 ? 【编号】:为样品进行名称编号,可编辑。 ? 【类型】:对于标准样品,类型为“标准样品“,对于未知样品,类型为“未知样品”。 ? 【浓度】:样品的浓度值。 ? 【吸光度】:样品的最终吸光度值。计算公式如表 6-1所示。

第6章 定量测定 37

表 6-1 定量测定计算方法

单波长法: 双波长法:

Abs?A1 Abs?A1?A2 Abs?A1?A2?K

双波长系数法:

三波长法:

Abs?A1?(W1?W2)?(A2?A3)?A3

W2?W3表中,【Abs】表示最终的吸光值,【W1】表示测定波长1,也称主波长。【W2】为测定波长2,也称基线波长1。【W3】为测定波长3,也称基线波长2。【A1】主波长的吸光值。【A2】基线波长1的吸光值。【A3】基线波长2的吸光值。【K】表示双波长系数法中的系数。

? 【测定波长的吸光度】:样品在相应波长点的吸光度值。 ? 【标准偏差】:重复测量的标准偏差值。 ? 【相对标准偏差】:重复测量的相对标准偏差值。如果未设置重复测量,标准偏差和相对

标准偏差均为零。

进行标准样品测量和未知样品测量时,可点击相应的测量表格,表格上方将显示“(使用中)”的字样,表示此表格已经激活,所有的测量均在此表格中操作。 校正曲线

校正曲线负责显示当前的校正曲线图形。如果您未进行标准样品测量,则无图形显示。 参数列表

参数列表显示当前的定量测量参数。包括曲线方程、系数等信息。 测量

如果您在定量测定参数设置中,将校正方法设置为浓度法,则在测量之前,需要在定量测定表格中输入标准样品的浓度值,然后才可以测量。输入浓度值的方法有两种,方法一:双击【编号】列中的空白格,输入样品编号后按回车键。系统会自动在表格中添加一行样品。然后点击对应样品的【浓度】,输入浓度值即可。方法二:不输入任何浓度值,直接点击测量按钮,此时系统会提示您输入一个浓度值,如图 6-7所示。

图 6-7 系统提示输入浓度值

输入浓度值后,点击【确定】按钮,系统会自动添加一个标准样品,将浓度值设置为您刚才设置的数值,并立即测量此样品。

38 UVWin5.0 使用指南

如果您在定量测定参数设置中,将校正方法设置为系数法,则不需要对标准样品进行测量。直接测量未知样品即可。

6.4 保存测量文件

定量测定的数据同样可以保存的磁盘。选择【文件】菜单下的【保存】子菜单,或点击“”按钮,即可打开文件保存窗口,在窗口中输入要保存的文件名,点击【保存】按钮即可。如果要对测量文件添加注释信息,可点击【注释】按钮,输入注释信息后点击【确定】按钮即可。

6.5 本章小结

本章向您介绍了UVWin5.0中定量测定的使用方法。定量测定对于紫外可见分光光度计来说是一个比较重要的功能。正确的运用定量测定中的测定方法,对分析结果起到了决定性的作用。

第7章 时间扫描

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:什么叫做时间扫描,如何设置时间扫描的参数,如何进行时间扫描,如何保存光谱文件。

具体包含以下内容: ? 时间扫描简介 ? 时间扫描参数设置 ? 时间扫描 ? 保存光谱文件 ? 本章小结

7.1 时间扫描简介

时间扫描是指按照一定的时间间隔,连续进行采样,并将采样数据以图形的方式进行显示的一种测量方法。此方法主要用于观察样品随时间的变化趋势。

7.2 时间扫描参数设置

激活时间扫描窗口,选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单,或点击“”按钮,即可打开时间扫描参数设置窗口。如图 7-1所示。

图 7-1 时间扫描参数设置窗口

40 UVWin5.0 使用指南

窗口主要由三个选项卡构成。分别是:【测量】、【仪器】和【附件】。其中,仪器和附件选项卡的设置方法与仪器性能和附件设置的设置方法完全相同,请参阅3.1仪器性能和3.7附件设置。下面向您介绍测量参数的设置方法。 时间扫描光度模式

设置时间扫描所使用的光度模式。您可以设置为Abs、T%等。系统会根据您设置的光度模式进行测量。 测量波长点

设置时间扫描的波长点。由于时间扫描是在固定波长点连续采集数据,因此,您需要设置一个采集数据的波长点。 显示范围

设置时间扫描谱图中纵向坐标的范围。您可以根据样品产生的数值大小对显示范围进行设置。 时间选项

时间选项允许您对时间扫描的扫描时间、采样次数和时间间隔等参数进行设置。 ? 时间单位

设置时间扫描的最小时间单位。可选的时间单位有:【分】和【秒】。例如,您将时间间隔设置为1,如果时间单位是“分”,表示每分钟采1次样;如果时间单位是“秒”,则表示每秒钟采1次样。

? 显示方式

如果您以分钟为时间单位,则可以选择时间的显示方式,也就是在测量过程中。如果您选择了【常规】,系统将会以常规的方式显示时间,也就是用数值表示。例如,50、120、300等。如果您选择了【时钟】,系统会按照时钟的显示方式来显示时间。例如,00:00:50、00:01:00、00:05:00等。

? 自动模式

自动模式是让系统为您选择一个合适的采样数和时间间隔。您只需要设置一个【扫描时间】即可。如果您没有选择自动模式,则需要设置采样数和时间间隔。

? 扫描时间

扫描时间表示完成一个扫描过程所需要的总时间。此选项只有在选择了自动模式时才可以使用。

? 采样数

采样数表示完成一次扫描所要采集数据的总的次数。采样数乘以时间间隔就等于一次扫描所需要的总时间。

? 时间间隔

设置每次采样的时间间隔。可以称为“采样频率”。 扫描方式

在时间扫描中,您同样可以进行重复扫描。您可以选择【扫描方式】选项卡,即可对重复扫描的参数进行设置。如图 7-2所示。

第7章 时间扫描 41

图 7-2 设置扫描方式

? 单次扫描:

不进行任何重复,即只进行一次扫描。 ? 重复扫描:

可设置【重复次数】和【时间间隔】。系统会根据您设置的重复次数进行重复扫描,并且每次间隔一定的时间,此时间由时间间隔决定。如果您的仪器配有多联样品池,您还可以选择【自动切换样品池】,系统在每次扫描之前会自动切换下一个样品池,然后再进行扫描。

? 自动扫描:

如果您的仪器配有多联样品池,您可以选择【自动扫描】。自动扫描的作用是对每个样品池的样品都扫描一便。也就是说,如果您安装了八联池,系统会在您启动扫描后,自动扫描八条图谱,并在扫描过程中自动切换样品池。 时间增量

如果您选择了重复扫描或自动扫描,您还可以设置一个额外的选项,就是【时间增量】。时间增量的作用是将每次扫描的总时间增加一个增量时间。

? 起点:【起点】表示开始使用时间增量启始重复次数。也就是当扫描重复到第几次时开始

加入时间增量。

? 终点:与起点的意思相同,【终点】表示终止使用时间增量的重复次数。 ? 增量:【增量】表示每次需要增加的时间,此时间是相对于上次扫描时间的百分比值。

7.3 时间扫描

如果您要进行时间扫描,可以选择【测量】菜单下的【开始】子菜单,或点击“”,即可开始时间扫描。在扫描的过程中,系统会将测量结果以图形的方式显示在时间扫描窗口中。如所示。

42 UVWin5.0 使用指南

图 7-3 时间扫描窗口

7.4 保存光谱文件

时间扫描的光谱文件同样可以保存。选择【文件】菜单下的【保存】子菜单,或点击“”按钮即可打开文件保存窗口,您可以在窗口中输入需要保存的文件名,然后点击【保存】按钮即可。

7.5 本章小结

本章主要向您介绍了UVWin5.0时间扫描的一些功能。时间扫描是观察样品随时间的变化而产生变化的一种很好的测量方法,合理的运用时间扫描可以对您的工作提供很大的帮助。另外,您还可以利用时间扫描配合我们下面将要向您介绍的图形处理功能,组合成不同的分析方法,完成不同的分析需要。

第8章 DNA蛋白质测定

本章要点

在本章中,我们将主要讲述以下内容:DNA蛋白质测定功能的用途,如何设置测量参数,如何进行测量,如何对测量结果进行处理。

具体包含以下内容:

? DNA蛋白质测定功能的用途 ? 启动DNA蛋白质测定功能 ? 设置测量参数 ? 处理测量结果 ? 本章小结

8.1 DNA蛋白质测定功能的用途

引文:随着 DNA的内部结构和遗传机制的秘密一点一点呈现在人们眼前,特别是当人们了解到遗传密码是由 RNA转录表达的以后,生物学家不再仅仅满足于探索、提示生物遗传的秘密,而是开始跃跃欲试,设想在分子的水平上去干预生物的遗传特性。如果将一种生物的 DNA中的某个遗传密码片断连接到另外一种生物的DNA链上去,将DNA重新组织一下,就可以按照人类的愿望,设计出新的遗传物质并创造出新的生物类型,这与过去培育生物繁殖后代的传统做法完全不同。这种做法就像技术科学的工程设计,按照人类的需要把这种生物的这个“基因”与那种生物的那个“基因“重新“施工”,“组装”成新的基因组合,创造出新的生物。这种完全按照人的意愿,由重新组装基因到新生物产生的生物科学技术,就称为“基因工程”,或者说是“遗传工程”。基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。

从引文中不难看出,基因分析是一个复杂而又具重要意义的工作。众所周知,基因工程对于全人类起到了很大的作用,研究人类基因已经成为发达国家的一项重要的科研课题,我国也相继开展了不同程度的科研工作。在对基因的分析上,分析工具起到了很大的作用。只有借助于良好的分析工具,才可以完成分析的目的。因此,在UVWin5.0软件中,增加了DNA/蛋白质测定功能。用户可以利用此功能对DNA/蛋白质进行浓度测量,同时还可以设置不同分析方法,从而满足不同的需要。

8.2 启动DNA蛋白质测定功能

如果您需要进行DNA蛋白质分析,可选择【应用】菜单下的【DNA蛋白质分析】子菜单,系统会打开DNA蛋白质测量窗口。如图 8-1所示。窗口可分为两个部分,位于中间部分的为显示窗口,可显示当前的测量结果。位于下方的是控制台,您可以通过点击控制台上的按钮来开启相应的功能。

44 UVWin5.0 使用指南

图 8-1 DNA蛋白质测定窗口

8.3 设置测量参数

在控制台按钮中,有一个名为【设置】的按钮,点击此按钮即可打开参数设置窗口。如图 8-2所示。

图 8-2 DNA蛋白质参数设置

? WL(A1,A2):表示DNA蛋白质的两个测定波长。 ? Df(A1,A2):表示DNA的两个系数。 ? Pf(A1,A2):表示蛋白质的两个系数。

如果您要进行320nm的背景校正,还可以点击【320nm背景校正】选择框,然后输入相应的校正系数即可。

DNA蛋白质的计算方法如下: ? 不进行320nm校正

DNA浓度=Df1×A1-Df2×A2 蛋白质浓度=Pf2×A2-Pf1×A1 ? 进行320nm校正

(A1 = A1-A320,A2 = A2-A320) DNA浓度=Df1×A1-Df2×A2 蛋白质浓度=Pf2×A2-Pf1×A1

本文来源:https://www.bwwdw.com/article/nrvr.html

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