楚雄师范学院 果蝇的单因子实验

姓名：卜令虎 班级：2011级葡萄酒班 学号:20111052101

果蝇的单因子实验

一、目的

1．学会饲养果蝇，掌握果蝇的杂交技术。 2．学会分辨果蝇的雌雄。

3．理解并且验证分离规律的原理。 4．学会用统计学方法处理实验数据。

二、原理

孟德尔第一定律（基因的分离定律）：一对基因在杂合状态中保持相对的独立性，而在配子形成时，又按原样分离到不同的配子中去。理论上配子分离比是1：1，子二代基因型分离比是1：2：1，若显性完全，子二代表型分离比是3：1。

果蝇的长翅（+）和残翅（vg）是一对相对性状。它们是位于常染色体上的一对等位基因。野生型果蝇的双翅是长翅，（+/+）翅长过尾部。残翅果蝇（vg/vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，无飞翔能力。vg的座位是第二染色体67.0。长翅对残翅显性完全。交配方式：用长翅果蝇与残翅果蝇交配，得到子一代都是长翅，子一代雌雄个体间相互交配，子二代产生性状分离，出现两种表型，呈3:1之比。 现以长翅雌蝇与残翅雄蝇交配为例

P： 长翅（♀）× 残翅（♂）

+/+ ↓ vg/vg F1： 长翅＋ /vg

↓♀. ♂相互交配

F2： 长翅 残翅 (1 +/+,2＋ /vg) (1 vg/vg)

果蝇双翅形状的遗传

三、材料与方法

材料：

黑腹果蝇 ( Drosophila melanogaster ) 中的两个品系： 1.长翅果蝇+/+

2.残翅果蝇vg/vg

器具：

双筒解剖镜，恒温培养箱，天平，培养瓶，麻醉瓶，毛笔、白瓷板,放大镜，棉花，镊子，大烧杯，电炉，玻璃棒，铁架台，漏斗，胶管，无数锥形瓶。

药品试剂 ：

乙醚、玉米粉、琼脂、葡萄糖、酵母粉、丙酸。

试验说明：

1．性状特征：野生型果蝇的双翅是长翅（+/+），翅长过尾部。残翅果蝇（vg/vg）的双翅几乎没有，只有少量裂痕，无飞翔能力。vg的座位是第二条染色体。长翅对残翅显性完全。

2．交配方式：用长翅果蝇与残翅果蝇交配，得到子一代都是长翅，子一代雌雄个体间相互交配，子二代产生性状分离，出现两种表型，呈3：1之比。

3．在这个试验中，子一代基因型为+/vg，可以产生两种配子，+和vg，各占1/2。雌雄都是这样。用棋盘法表示这个杂交试验如表：

F1♀配子 F1♂配子 1/2 + 1/2 vg 1/2 + 1/4 +/+ 长翅 1/4 +/vg 长翅 1/2 vg 1/4 +/vg 长翅 1/4 vg/vg 残翅 因为长翅对残翅显性，+/+ 、vg/vg基因型都表现出长翅性状。只有vg/vg才呈现残翅。所以F2代群体中，长翅与残翅比例为3：1。其中长翅中有2/3为杂合体+/vg，1/3为纯合体+/+，但在表型上无差别。F2代群体越大，越接近理论比。实得比数符合理论比数的程度

2如何，需要进行X测验。

方法：

1. 培养基的配制：4-5人为一组，按照所需的量配制相应的培养基。现在以300ml为例，培养基的配方如下：

A：葡萄糖23.45g,琼脂2.345g，加蒸馏水150ml，煮沸溶解。

B:玉米粉30.9375g,加水150ml，加热搅拌均匀后，在加2.625g酵母粉。 将A和B混合加热成糊状后，加1.875ml丙酸，即可分装到培养瓶中。

每瓶分装30ml左右，将瓶壁擦拭干净后，用纸包扎好后即可进行高压蒸汽灭菌。灭菌后在2到3天内未发生霉变，即可用。

2．选野生型和残翅果蝇为亲本，做正交和反交组合。雌蝇一定要选处女蝇。处女蝇在试验前2－3天陆续收集，数目多少根据需要而定。

3．把长翅果蝇和残翅果蝇进行杂交，正交与反交各一瓶。即：长翅（♀）×残翅（♂）。 （1）把长翅处女蝇倒出麻醉，挑出5－6只移到杂交瓶中。（2）其次把残翅倒出麻醉，在放大镜下，白磁板上仔细挑出5－6只雄蝇，移到上述杂交瓶中。（3）贴好标签：杂交瓶放到23℃温箱中培养。反交和正交的方法一样。

4．7－8天后，倒出亲本果蝇。

5．再过4－5天，F1成蝇出现，观察F1翅膀，连续检查2－3天。

6．麻醉F1成蝇，移出5－6对果蝇，放到另一培养瓶内。这里雌蝇无须处女蝇，在23℃温箱中培养。

7．7－8天后，移动F1亲本。

8．再过4－5天，F2成蝇出现，开始观察。连续统计7－8天。统计过的果蝇放到死蝇盛留器中。

四、结果与分析

果蝇单因子杂交实验过程记录

观察日期 5.23 培养箱温度（ ℃） 28.0 大气压 （KPa） 82.13 过程记录 培养基的配制 本实验所需的长翅和残翅果蝇的接种扩繁 培养基中有幼虫出现 处女蝇开始出现，连续收集三天 进行杂交（正反交各一瓶），每瓶接种7对 5.28 27.2 81.85 6.1 27.8 82.13 6.7 27.7 83.19 6.7 28.3 83.98 6.10 27.9 83.34 培养基中有幼虫出现 6.18 28.5 82.83 成熟蛹（变为黑色或是灰色）出现，移除亲本 有F1成蝇出现，记录所观察的现象，并同时进行杂交 观察并统计了F1成蝇的性状，继续进行接种 观察并统计了F1成蝇的性状，继续进行接种足10对 6.19 27.3 81.32 6.20 28.1 81.85 6.21 28.5 82.17 6.23 27.5 83.27 培养基中有幼虫出现 6.29 27.8 83.75 成熟蛹（变为黑色或是灰色）出现，移除亲本 6.30 27.9 83.15 有F2代成蝇出现，观察并统计了所观察到的结果 7.1 27.8 82.95 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.2 28.2 83.12 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.3 28.1 82.85 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.4 27.9 83.52 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.5 28.3 82.93 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.6 28.0 83.58 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 7.7 28.1 82.38 观察并统计了F2代成蝇所观察到的性状 F1代结果统计表：

正交 观察结果 ＋/＋×vg/vg ♀ 统计日期 长翅数 6.18 16 残翅数 0 6.19 20 0 23 0 6.20 27 0 29 0 28.5 82.88 长翅数 13 0 27.3 82.34 残翅数 26.6 82.39 ♂ ♀ ♂ 度（℃） vg/vg×+/+ 实验室温大气压（KPa） 反交 6.21 6.22 6.23 合计 比例 28 18 24 133 100％ 0 0 0 0 0 32 23 16 136 100％ 0 0 0 0 26.4 27.1 26.7 83.12 81.79 82.57 0 F2代结果统计表:

正交 ＋/＋×vg/vg ♀ ♂ 反交 vg/vg×+/+ ♀ ♂ 观察结果 统计日期 长翅数 残翅数 长翅数 残翅数 实验室温度（℃） 大气压（KPa） 6.30 17 31 25 30 28 25 33 25 25 239 75.4％ 5 9 8 12 7 8 13 8 8 70 24.6％ 10 22 27 33 30 25 22 19 19 207 74.6％ 4 7 9 11 11 7 7 8 8 72 26.4％ 26.2 26.3 27.7 26.1 27.0 26.8 27.4 26.4 7.1 82.22 82.85 81.89 82.47 83.14 82.18 82.45 83.03 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 合计 比例

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