家兔呼吸运动的影响因素
更新时间:2023-09-13 23:58:01 阅读量: 教学研究 文档下载
实验目的:
学习哺乳类动物急性实验的常规操作(动物麻醉、手术前固定、手术器械的正确使用、血管与神经的分离、动脉插管、气管插管等技术),掌握动脉血压的直接测量法和呼吸运动的间接测量法。观察某些重要的神经、体液因素对动脉血压和呼吸的作用,以及两个系统功能间的相互影响。
实验原理:
正常情况下,机体的动脉血压保持相对恒定。这种恒定是通过神经体液调节实现的。神经调节主要是心血管反射,其中最重要的是颈动脉窦和主动脉弓压力感受性反射。体液调节最主要的是儿茶酚胺类激素(如肾上腺素和去甲肾上腺素)。同时,机体又是各个系统相互影响的整体,除心血管调节中,还可伴随着其他系统的改变,如呼吸系统、泌尿系统等。
实验动物:家兔
实验器材和药品:PowerLab 8S主机,呼吸换能器,血压换能器,生物电放大器,兔板,手术器械,注射器,手术照明灯,纱布,动脉夹,动脉插管,气管插管,刺激保护电极,1%戊巴比妥钠,生理盐水,1,250单位/ ml肝素,1:10,000去甲肾上腺素,3%乳酸等。
实验步骤: 1. 动物准备:
⑴.家兔捉持、称重和麻醉:家兔的捉持和称重方法参见P12“动物的捉持和称重”。以1%戊巴比妥钠溶液每公斤体重3 ml,从远离耳根部位的耳缘静脉中缓慢注射,麻醉家兔。注射时密切观察动物的呼吸、心跳、肌张力、瞳孔反射等,以防麻醉过深而死亡。麻醉后,家兔仰卧于兔板上,四肢和门牙用绳子固定。注意颈部必须放正拉直,以利于手术。
⑵.颈部剪毛、手术以及分离颈总动脉、神经和气管:剪去颈部手术野的兔毛,剪下的兔毛应及时放入盛水的杯中浸湿,以免到处飞扬。在甲状软骨下缘沿正中线用手术刀切开皮肤,切口5~7 cm。用止血钳逐层分离皮下组织和肌肉,暴露气管。在气管两侧深层,找到颈总动脉鞘内的颈总动脉,颈总动脉鞘内还有三根神经,最粗的是迷走神经,其次是交感神经,减压神经最细。在打开颈总动脉鞘前先仔细分辨这三根神经。用玻璃分针游离右侧迷走神经、左侧三根神经以及颈总动脉,用不同颜色的棉线穿线备用。每条神经和颈总动脉分离约2~3 cm。注意不要过度牵拉和钳夹神经,以免神经受损。右侧颈总动脉分离约5 cm,下穿两根线,分别作为结扎和固定动脉插管用。分离气管,在气管下穿线备用。
⑶.气管插管:在气管靠近头端用剪刀剪一倒T字形的切口,插入气管插管,用线固定,以保证家兔呼吸通畅。
⑷.动脉插管:插管前检查插管的开口处是否光滑,以防插入后戳破
血管。在插管内灌注生理盐水,再注入1 ml左右1250单位/ ml的肝素溶液,以防凝血。排净管内气泡。将右颈总动脉的远心端结扎(注意分支的甲状腺动脉,可两端结扎后剪断)。用动脉夹夹住颈总动脉的近心端,在结扎处和动脉夹之间,距离应在3 cm左右,便于插管。用锋利的眼科剪在靠近远心端结扎处向下作一斜形切口,约为管径的一半。然后将动脉插管向心脏方向插入颈总动脉,用已穿好的棉线结扎,并缚紧固定于插管的侧管上。保持插管和动脉的方向一致,防止血管壁被插管刺破。打开动脉夹,即可见血液冲入动脉插管中。打开输液开关,血液的动脉压作用于血压换能器,即可记录血压的波动。 ⑸.心电图电极放置:在家兔的右上肢、左右下肢上插入针式电极,分别与生物电放大器的负极、正极和接地极相连,引导家兔的Ⅱ导联心电图。
⑹.呼吸换能器的放置:把呼吸换能器与气管插管一端连接,通过测量气体流速反映呼吸运动。
2.仪器准备:
⑴.按照图3-35连接仪器:
⑵. 启动计算机,打开PowerLab主机电源,在桌面上单击Chart4 for windows图标,进入Chart应用程序窗口。
⑶.用鼠标左键单击菜单栏的Setup,选取Channel settings选项,在通道设置对话框中对通道数目、名称、幅度范围进行设置(参见P37通道的设置)。把通道数设置为5,按OK钮保存设置并退出该对话框。屏幕上出现5个通道显示区。从第一通道开始依次显示心电图、瞬时心率、动脉血压、呼吸流速波、刺激波。 ⑷.选择采样速度为1 K/s,显示比例为50:1。 ⑸.各通道参数的设置:
* Channel 1显示区域显示家兔的心电图。放大器参数设置参见P38放大器参数设置。Range 为2 mV,High Pass 为0.3~10Hz,Low Pass为1 KHz或更小。如果心电图波形方向相反,可选中Invert来倒转波形。选50 Hz Notch来抑制交流干扰。
* Channel 2显示区域显示家兔的瞬时心率。Raw data input选择通道1,Function功能选项选取Ratemeter,Range 设置为500。方法参见P40即时数据统计的设置。
* Channel 3显示区域显示家兔的动脉血压。放大器参数设置参见P38放大器参数设置。Range 为10~50 mV, Low Pass为100 Hz。如果在Bridge Amplifier设置对话框左侧的信号显示窗口中看不到输入信号,可用鼠标左键单击右侧的zero按钮,系统自动调整输入信号的零位。单击Bridge Amplifier设置对话框下方的units按钮,进入Units Conversion(单位转换)对话框。单位转换的方法参见P39信号幅度范围的设置和单位的转换。
* Channel 4显示区域显示呼吸流速波。放大器参数设置参见P38放大器参数设置。Range 为10~50 mV, Low Pass为100 Hz。 * Channel 5显示区域显示刺激方波。在刺激参数设置对话框下方的Stimulator Marker框中选取Channel 5。刺激设置方法参见P42刺激输出的设置。设置完毕后,单击菜单栏的setup,选取stimulator panel,弹出Stimulator Panel(刺激面板),在实验中可以方便地由刺激面板来设置刺激频率、幅度和波宽等参数。设置Mode为Pulse,单击Hz选项,Frequency 取32 Hz,Pulse Duration选0.1 ms。选中Continuous选项,表示连续的一定频率的刺激输出。Output Range为10 V,Amplitude为1~5 V。刺激神经前先用刺激保护电极刺激家兔的颈部肌肉,以检查刺激输出是否有效。实验中如要对标本进行刺激,应先用鼠标左键单击开始/停止切换按钮,程序开始采样记录,
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