DEPC和DEPC水

DEPC和DEPC水区别

DEPC是一种潜在的强诱变剂，引用《分子克隆》。因此操作人员使用过程中配套防护用具小心操作。

DEPC及DEPC水的区别：DEPC一般也是液态。(DEPC也有固体粉末，但一般商品化的流通都是液态的）这就容易造成DEPC和DEPC水的很难区分。

注意：DEPC水需要高压灭菌才能是水里面的DEPC分解成二氧化碳，酒精等，才不会导致DEPC残留影响后续实验，不会对环境造成污染。 DEPC水是用DEPC(diethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的纯水。经检测不含RNase、DNase和proteinase。 物理性质

分子式：C6H10O5 分子量：162.1

外观：无色液体 折射率：1.398（20°C） 密度：1.12g/ml 摩尔浓度：6.9M

DEPC气味芳香浓烈，强挥发性，有毒，需在通风橱中操作。 化学性质

DEPC对湿气和酸碱敏感，在乙醇和二氧化碳的水溶液中缓慢分解，在155°C自行分解。DEPC在氨水中特别不稳定，生成一种致癌的聚氨酯胶的物质。 DEPC对核酸酶有积极地抑制作用。（主要是对含有-NH，-SH，-OH活性部位的酶起作用）。

使用要点：

DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。

通常使用0.1%的DEPC水溶液使Rnase失活，即1ml DEPC溶于1L纯净水中。溶解时，DEPC不会很快溶解，开始时以小球的形式存在于溶液中，因此要在搅拌器中搅动直到小球消失为止。DEPC自行分解成乙醇和二氧化碳很慢，可以通过高压灭菌处理破坏DEPC或水溶液中煮沸15分钟以上。 注意事项

保存：避光 干燥 密闭容器于2-8°C 注：使用时要戴乳胶手套和口罩。如果不慎溅到皮肤或眼睛，应立即用大量清水冲洗，如果感到不适，就医。

一般生物实验室所需的DEPC水配制：

（1） DEPC水的配制：每600mL水中加入600uL DEPC，配成DEPC水，摇床过夜次日，高温高压灭菌30min，即得到DEPC Treated Water （2） 1mL tip、1.5mL tube和镊子的处理： 用1‰的DEPC水（DEPC和蒸馏水按照1‰的比例混匀配制而成）过夜浸泡1mL tip、1.5mL tube和镊子（1ml tip主要是用来分装用的，几支就可以了。1.5ml tube和1ml tip浸泡时要确保DEPC水充满整个内腔。）次日，将tip和tube

控干水分（可用镊子转移到新的用DEPC水过夜浸泡过的容器中，因水分未控干，会使得烘干很困难），镊子用铝箔包裹，高温高压灭菌30min （3） 分装：超净工作台提前用酒精棉球擦一遍，紫外灭菌1mL tip、1.5mL tube和镊子在烘干箱内烘干，在超净工作台内分装DEPC Treated Water（取1.5ml tube时使用镊子，而不要用手，避免污染。）

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