微生物实验

实验二 理化因子对微生物的影响

实验目的：

1 了解紫外线对微生物生长的影响。 2 了解不同化学物质对微生物生长的影响。 3 了解理化因素抑制或杀死微生物的试验方法。 实验原理：

1 紫外线对微生物有明显的致死作用，使细菌致死的紫外线波长是200-310nm，而以260nm左右的紫外线具有最高杀菌效应。作用机理是诱导胸腺嘧啶二聚体的生成，从而抑制DNA的复制。经紫外线照射受损伤的细菌细胞，如立即暴露于可见光下，则有一部分可恢复正常活力，称为光复活现象。

2 一些化学药剂对微生物的生长有抑制或杀死作用，因此，在实验室内及生产上常利用某些有效的化学药剂进行杀菌或消毒。不同的化学药剂对不同的细菌，杀菌能力并不相同，而一种化学药剂对不同细菌的杀菌效果也不一致。 实验材料：

1 菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。 2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基。

3 器材与试剂：滤纸、镊子、培养皿、涂棒、试管支。 75%乙醇、 1%结晶紫、 0.2mg/L青霉素、 0.1%KMnO4、 实验方法： 一 紫外线杀菌实验

1 将已灭菌冷却到50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒入无菌培养皿中，水平放置待凝固。

2 用无菌吸管吸取0.1ml培养24h的枯草芽孢杆菌菌液加入上述平板中，用无菌三角涂布棒涂布均匀。

3 在无菌工作台中，以无菌操作的方法将黑纸片放入培养皿中，紫外线照射15min，取出，用纸包好，在37℃温室中培养24h后观察。

二 化学消毒剂实验

1 将已灭菌的并冷却到50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中，水平放置待

凝固；

2 用无菌吸管分别吸取0.1ml培养24h的枯草芽孢杆菌和大肠杆菌菌液加入

上述平板中，用无菌三角涂布棒涂布均匀；

3 将以涂布好的平板底皿划分为四等分，每一等分内标明一种消毒剂的名称； 4 用无菌镊子将已灭菌的小圆纸片分别浸入装有各种消毒剂的试管中浸湿； 5 将上述贴好滤纸片的含菌平板倒置放于37℃条件下培养24h后观察抑菌圈

的大小。

结果记录和数据处理：

1 绘图说明紫外线的杀菌作用及原理。 2 列表比较化学消毒剂对两种细菌的抑制作用。 化学试剂 75%乙醇 1%结晶紫 0.2mg/L青霉素 0.1%KMnO4

思考题：

1作图并列表记录实验结果，同时比较四种化学药剂对两种细菌的杀（或抑）菌作用。

2 为什么75%的乙醇对革兰氏阴性菌的作用效果好于革兰氏阳性菌？ 3 紫外线实验中为什么要用黑布包裹培养？

菌种 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌

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