LPS诱导小鼠血小板减少症机制的研究

天津医科大学博士学位论文

目录

中文摘要........................................................................................................................I Abstract........................................................................................................................IV 缩略语/符号说明.....................................................................................................XIV 研究现状、成果.. (1)

研究目的、方法 (3)

一、单次腹腔注射不同剂量LPS诱导小鼠TCP模型的建立 (5)

1.1对象和方法 (5)

1.1.1实验动物及饲养条件 (5)

1.1.2主要仪器设备及试剂 (5)

1.1.3分组及腹腔注射LPS诱导小鼠TCP模型的建立 (5)

1.1.4实验标本的留取及血常规的检测 (6)

1.1.5观察指标 (6)

1.1.6统计学方法 (6)

1.2结果 (6)

1.2.1腹腔注射LPS对小鼠一般状况的影响 (6)

1.2.2腹腔注射不同剂量LPS对小鼠死亡率的影响 (6)

1.2.3单次腹腔注射不同剂量LPS对小鼠PLT、MPV及PDW的影响 (7)

1.3讨论 (10)

1.3.1LPS诱导的小鼠快速TCP模型的方法的确立及评价 (10)

1.3.2LPS诱导的TCP时血小板各项参数变化的规律及意义 (12)

1.3.3单次LPS刺激诱导的血小板释放具有双时相性 (13)

1.4小结 (13)

二、炎症反应及凝血状态与LPS诱导小鼠TCP关系的研究 (15)

2.1对象和方法 (15)

2.1.1.实验动物及饲养条件 (15)

2.1.2主要仪器和试剂 (15)

2.1.3分组及处理 (16)

2.1.4标本采集与处理 (17)

2.1.5ELISA原理及实验步骤 (17)

IX

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2.1.6组织病理学检测 (19)

2.1.7实时定量PCR检测（Real-time PCR）的原理及实验步骤 (19)

2.1.8统计学方法 (22)

2.2结果 (22)

2.2.1PLT (22)

2.2.2腹腔注射LPS对小鼠血浆炎症因子的影响 (24)

2.2.3腹腔注射LPS对小鼠凝血系统的影响 (26)

2.2.4肺组织病理学检测 (28)

2.2.5腹腔注射LPS对小鼠促血小板生成素表达的影响 (30)

2.3讨论 (32)

2.3.1腹腔注射LPS诱导TCP时炎症反应状态与TCP的关系 (32)

2.3.2腹腔注射LPS诱导TCP时凝血系统状态与TCP的关系 (33)

2.3.2腹腔注射LPS对小鼠血小板生成的影响 (37)

2.4小结 (38)

三、LPS诱导血小板凋亡的研究 (39)

3.1对象及方法 (39)

3.1.1分组及处理 (39)

3.1.2主要仪器及试剂 (39)

3.1.3洗涤血小板的制备 (42)

3.1.4洗涤血小板质量的评价 (43)

3.1.5化学发光法测定血小板ATP水平的变化 (43)

3.1.6Annexin-V单染法测定血小板PS暴露水平 (44)

3.1.7DiOC6染色测定血小板线粒体膜电位（ΔΨm）变化 (44)

3.1.8化学发光法测定血小板Caspase-3活性 (45)

3.1.9Western-Blot测定血小板凋亡相关蛋白表达变化 (46)

3.1.10统计学方法 (47)

3.2结果 (47)

3.2.1光镜下血小板形态特点 (47)

3.2.2化学发光法测定不同浓度LPS对血小板ATP水平的影响 (47)

3.2.3Annexin-V单染法测定血小板PS暴露水平 (49)

3.2.4DiOC6染色测定血小板ΔΨm变化 (50)

X

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3.2.5化学发光法测定血小板Caspase-3活性的变化 (51)

3.2.6Western-Blot测定血小板凋亡相关蛋白表达变化 (52)

3.3讨论 (53)

3.3.1凝血酶或LPS对血小板ATP水平的影响 (55)

3.3.2凝血酶或LPS对血小板PS外翻的影响 (56)

3.3.3凝血酶或LPS对血小板ΔΨm的影响 (56)

3.3.4LPS对血小板Caspase-3活性的影响 (57)

3.3.5LPS诱导血小板凋亡信号通路的探讨 (57)

3.3.6LPS诱导血小板凋亡内源性线粒体途径机制的探讨 (60)

3.3.7LPS诱导的血小板凋亡的意义 (62)

3.4小结 (62)

全文结论 (63)

论文创新点 (65)

参考文献 (66)

发表论文和参加科研情况说明 (74)

综述 (75)

综述参考文献 (92)

致谢 (101)

XI

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本文来源：https://www.bwwdw.com/article/y0le.html