应用ELISA方法检测犬狂犬病血清抗体试验

应用ＥＬＩＳＡ方法检测犬狂犬病血清抗体试验

摘要 运用ELISA方法检测狂犬病抗体水平，试验结果表明：检测狂犬病抗体阳性率达92.5％，免疫效果基本满意。运用此方法较简单、操作方便、灵敏度高、特意性强，值得推广运用。同时，分析了免疫失效的原因。

关键词 ELISA方法；狂犬病；血清抗体；检测

狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患疾病，人和所有温血动物对狂犬病毒都易感，该病广泛分布于全世界，是一种自然疫源性疾病。目前检测狂犬病血清抗体的方法有快速荧光灶抑制试验（RFFIT）和小鼠中和试验（NIH）、间接免疫荧光试验、间接血凝试验等。其中快速荧光灶抑制试验（RFFIT）和小鼠中和试验（NIH）是OIE推荐的方法，但是这2种方法检测时间长，检测条件要求高，不适用于大规模的血清检测。本试验运用ELISA方法检测了犬狂犬病抗体水平，现报告如下。

1材料与方法

1.1 被检血清

共40份，采自东莞市望牛墩镇免疫狂犬病疫苗至少30d以上的犬只。

1.2 试剂

①狂犬病ELISA试剂盒，购自法国SYNBIOTICS公司，批号为6SRAB304，6SRAB305。②狂犬病OIE标准血清，法国狂犬病OIE参考实验室提供。

1.3 方法

（1）将OIE标准血清稀释7个稀释度，分别为1∶10、1∶30、1∶100、1∶150、1∶300、1∶1 000、1∶3 000，样品56 ℃灭活30 min后1∶10稀释。

（2）向每个酶标板微孔中加入90μL样品稀释液，然后分别加入10μL阴性和阳性质控、10μL稀释好的样品和10 μL OIE稀释血清（浓度从1∶10到1∶3 000）。质控、样品和各浓度的OIE血清均做双孔。37℃温育1h。

（3）用300 μL洗液洗4次，并在吸水纸上将检测板拍干。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/fe0v.html