3临检室作业指导书 2
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临检室作业指导书文件编号:巨鹿县医院-LJ-01~
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生效日期:2013年1月1日
巨鹿县医院检验科
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精液常规检查(仪器法)
1. 实验原理
纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:必须禁欲(包括遗精和手淫)3~7天。这是因为少于48小时采取的精液,因相距时间太短,精液中精子的数量可能偏少,容易造成少精症的假象。如果超过7天,精子活率、活力都有所下降,也可造成弱精子症的假象。精液检查应间隔一周或两周,要进行2~3次检查。因为一个人精子的产生在一年中,可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。
2.2 标本种类:精液
2.3 标本要求:用清洁干燥小瓶收集,不应采用避孕套内精液。
3. 标本储存:立即送检。
4. 标本运输:室温运输,冬季需保温运输。
5. 标本拒收标准:久置标本,污染标本,避孕套内标本。
6. 操作步骤
6.1 点击精液分析图标打开软件。输入操作员编号及密码,进入测试界面。点击新建病历按钮,输入患者信息,纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。
6.2 取新鲜标本混匀后,用滴管取精液冲入精液分析专用计数池,打开与电脑联机的显微镜,调好焦距。点击页面自动检测按钮,重复自动检测5个视野以上。点击主观计数按钮,以主观分析当前视野精子形态并输入空格。最后点击打印按钮,选择当前患者姓名打印报告。
6.3 精子的活动力,可五级报告:
0级:精子完全不活动,加温后仍不活动;
I级:精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;
II级:精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;
III级:为中速运动;
IV级:精子活动好,快速直线运动,很快超越一个视野,活泼有力。
7. 结果判断与分析
7.1 一般性状检查
7.1.1 量:正常人一次排精2~5ml。
7.1.2 颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和肿瘤,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。
7.1.3 粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。
7.1.4 酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH 7.2-8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。
7.2.1 精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。
7.2.2 精子活动力:正常精子活动力应在III级以上,若>40%的精子活动不良,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生7.2.3 精子计数:正常人精子计数为10~130×109/L,相当于一次排出的精子总数为400×106~600×106。当精子计数值<20×106/ml或一次排精总数<100×106为精子减少,超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后,连续检查无精子,说明手术成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。
7.2.4 精子形态:正常精液中,异常形态精子应少于10%~15%,如果精液中异常形态精子数>20%,将会导致不育,可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。如果精液中发现>1%的病理性未成熟细胞,包括精原细胞、精母细胞和发育不完全的精细胞,提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。如果精子凝集>10%,提示生殖道感染或免疫功能异常。
8. 注意事项
8.1 出现一次异常结果,应隔一周后复查,反复查2-3次才能得出比较正确的结
果。
8.2 如低倍镜、高倍镜检查均无精子,应将精液离心沉淀后再涂片检查,如两次均无精子,报告“无精子”。
9. 操作性能:快速简便
10. 方法局限性:易受人为主观经验不足影响结果判断。
11. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,149-150
粪便常规检查(直接涂片法)
1. 实验原理:本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:无须特殊准备。
2.2 标本种类:粪便
2.3 标本要求:标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。
3. 标本储存:粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:尿液、植物、泥土、污水等污染标本;干结粪便
6. 操作步骤
6.1 肉眼观察粪的颜色、性状。
6.2 再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本,涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片上。
6.3 盖上盖玻片,涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
6.4 先在低倍镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等,再在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶,并观察粪便中的菌群分布。
7. 结果判断与分析
7.1 粪便颜色根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色:灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏;绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时;红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等;柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;米泔水样见于霍乱。
7.2 性状可报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。
7.2.1 球形硬便::便秘时可见。
7.2.2 粘液稀便:见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
7.2.3 粘液脓性血便:多见于细菌性痢疾。
7.2.4 酱色粘液(可带脓)便:多见于阿米巴痢疾。
7.2.5 稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及了隐孢子虫感染。
7.2.6 米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱等。
7.2.7 扁平带状便:可能因直肠或肛门狭窄所致。
7.3 蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辩。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
8. 临床意义:为各类消化道疾病提供协助性诊断;查找并鉴别寄生虫。
9. 操作性能:快速简便
10. 方法局限性:有时会受主观因素的影响
11. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,139-141
12. 注意事项
12.1 虫卵的报告方式:未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。
12.2 应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
12.2 细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。
12.3 夏科-雷登结晶:为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
12.4 细菌:占粪便净重的1/3(4000亿/g干粪),正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌,占80%;而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%;芽孢菌(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。
正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致,除涂片染色找细菌外,应采用不同培养基培养鉴定。
粪便潜血试验(ST-OBT)定性(纸片法)
1. 实验原理:ASK粪便潜血纸片法是一种用于检测粪便中是否含有潜血的试剂。反应原理如下:
血红素(Hb)+ 双氧水(H2O2)→水(H2O) + 氧(O2)
氧(O2)+ 氨基比林→蓝紫色
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:收集标本前三天禁食动物性食物、肝脏及含叶绿素食物、铁剂、中药以免引起假阳性反应。
2.2 标本种类:粪便
2.3 标本要求:标本应取自粪便的不同部位;收集标本后迅速检查,以免因长时间放置使潜血反应的敏感度降低。
3. 标本储存:粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:久置硬结粪便
6. 试剂
6.1 试剂名称:便隐血(OB)试剂(匹拉米洞半定量检测法)
6.2 试剂生产厂家:珠海贝索生物技术有限公司
6.3 包装规格:100人份/盒
6.4 试剂盒组成:
6.4.1 便隐血(OB Paper)半定量测试卡100pcs:试纸上涂有氨基比林。
6.4.2 显色剂A(DeveloperA):匹拉米洞
6.4.3 呈色液(DeveloperB):溶液中含有3-5%双氧水。
6.4.4 竹片(Sticks)
6.4.5 阳性对照液
潜血试纸100pcs
显色剂A 1支*10ml
显色剂B 1支*10ml
阳性对照液1支*2 ml
竹片100支
6.5 试剂储存条件及有效期:室温保存,有效期内皆可使用。
7. 操作步骤
7.1 打开潜血试纸正面封盖,用竹片搜集少量粪便检体,涂抹于A窗。
7.2 再用竹片搜集少量不同部位之粪便检体,涂抹于B窗
7.3 盖上封盖。
7.4 打开背面呈色窗,各滴两滴呈色液于A窗及B窗之背面。
7.530秒内判读完毕。
8. 结果判断与分析
8.1 滴完呈色液,立刻产生蓝紫色,报告为“++++”
8.2 滴完呈色液,10秒内产生蓝紫色,报告为“+++”
8.3 滴完呈色液,1min秒后产生蓝紫色,报告为“++”
8.4 滴完呈色液1-2min内才逐渐产生紫红色。报告为“+”
8.4 滴完呈色液,于判读时间内无蓝紫色产生,报告为“阴性”
9. 临床意义
9.1 适合于检测粪便之潜血。
9.2 消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。
9.3 消化道恶性肿瘤时,粪便潜血可持续阳性。
10. 操作性能:快速简便、安全性高、灵敏度适中
11. 方法局限性:呈色反应与判读的时间控制会受主观因素影响
12. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,142-143
13. 注意事项
13.1 本品为一次性使用体外诊断试剂。
13.2 超过有效期,不能使用。
尿沉渣检查(仪器法)
1. 实验原理
科宝XS 全自动尿有形成分分析仪完全依照尿有形成分显微镜检查操作规程设计,自动变焦光学显微镜下,CCD 高速摄取数字图像,计算机处理软件加以识别分类报告各有形成份。
2. 标本采集及运送
2.1 标本采集:实验室工作人员、医生、护士必须对病人留尿进行指导,务必使尿道口保持清洁。随机尿液标本的留取无特殊时间规定,但病人必须有足够的尿量(10ml以上);晨尿指病人起床后第一次尿;收集“时段尿”时,应告病人时间段的起点和终点,起始时间先排空膀胱;三杯试验留尿时间要分段明确,做好标记。送检单上应注明留尿时间、送检时间。
2.2 标本的运送:按上述要求留取尿液应在2小时内完成检验,如果标本收集后2小时内无法完成分析,可置2-8℃冷藏,6小时内完成检验;如仅作尿沉渣检查,可在尿标本中加适量防腐剂(大多使用400g/L的甲醛溶液,每升尿液加入5ml。应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物,干扰显微镜检查)。
2.3 标本的标记:标本容器必须有标记,包括:病人姓名、特定编码(或住院病人的病区、床号)、标本收集时间。标签应贴在容器上,不可贴在盖上。
2.4 标本的接收:实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查标本容器是否符合要求;标记内容与医生所填写化验单是否一致;从留尿到接收标本的时间是否过长;标本是否被污染。尿标本量不少于10ml,在特殊病例不可能达到此要求时(如小儿、烧伤、肾衰无尿期等),应在检验报告单上注明收到的尿量及检查方法(离心或未离心)。
3. 试剂
3.1清洗液去离子水
3.2 清洁液 5 %次氯酸钠
3.3 试剂储存条件:室温贮存。
4. 仪器设备
科宝XS 型全自动尿有形成分分析仪。型号:COMBI SCAN XS
5. 操作步骤
5.1操作前准备:将蒸馏水注入仪器的洗液桶,将计数池装入转盘。
5.2 开机:打开PC 主机及仪器的电源开关(仪器为左侧红色按钮),仪器自动启动并自
检。
5.3 登陆系统:系统自检成功后PC 自动登陆进入主菜单(检测界面),屏幕右侧按钮分
别是MEASURE(检测界面),DATA(数据库界面),SETTINGS(设置界面),EXIT(关
5.4选择工作模式:仪器提供“AUTO(自动)”和“MANUAL(手动)”两种模式。(注:两
种模式的区别主要是:在“MANUAL(手动)”模式下,可以人为的输入标本的数量,
并按照输入的标本数量进行检测)。
5.5加入样本:尿液样本注入试管内,将试管放入试管架内,然后把试管架放在移动单元上。
5.6开始检测:点击“START MEASUREMENT(开始检测)”,检测开始运行。5.7停止检测:点击“STOP MEASUREMENT(停止检测)”,
5.8 查看数据:点击屏幕右边“DATA(数据库)”按钮,进入数据库界面;左边是标本的ID 号码及病人信息,右边是对应的检测结果。(注:此时数据可以被传输或者是删除)。
5.9关机:点击“EXIT(关机)”按钮,
7.仪器保养:
7.1 每日工作结束后进行自动清洗过程(注清洗前先移去计数池前导轨)
7.2仪器自动清洗使用2℅次氯酸钠溶液,过程如发生意外阻塞,则使用5℅次氯酸钠执行清洗过程。
7.3不定时清倒废液。
10. 临床意义
10.1 尿内白细胞增加,表示泌尿系统有化脓性炎症。红细胞增加,常见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。
10.2 透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中;当有轻度或暂时性肾或循环功能改变时,尿内可有少量透明管型;在肾实质性病变如肾小球肾炎时,可见较多的颗粒管型。
10.3 红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。颗粒管型的出现,提示肾单位有淤滞的现象。脂肪管型的出现,见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。
10.4 在慢性肾功能不全时,尿内出现肾衰竭管型,提示预后不良。
10.5 蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变,见于慢性肾小球肾炎的晚期和肾淀粉样变时。
11. 参考文献
11.12001-2002年度深圳市检验医学论文汇编(第七期)
11.2 中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,85-86
血疟原虫(MP)厚血片检查法(手工法)
1. 实验原理
应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。
2. 标本采集
2.1标本采集前病人准备:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血;恶性疟患者,应在发作后20h左右采血。
2.2标本种类:全血或末梢血
2.3标本要求:厚血片的溶血要及时。
3. 标本储存:厚血片的放置期限在夏季不超过48h,冬季不超过62h。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染。
6. 操作步骤
6.1 在洁净玻片上,滴患者血液2滴。
6.2 用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜,在室温中自然干燥。
6.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴,完全覆盖血膜,溶血数分钟。脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色,倾去溶血液。
6.4 不必待干,进行瑞氏染色。
6.5 干后镜检。
7. 结果判断与分析:在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”;发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。
8. 临床意义:本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。
9. 操作性能:快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛
10. 方法局限性
10.1 易受溶血不完全的影响。
10.2 经验缺乏者易受其他杂物的影响。
10.3 存在主观判断的失误
10.4 不易鉴别出疟原虫的种类。
11. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二
版).1997,85-86
12. 注意事项
12.1 染色后,水洗时不要先倒去染液,应让清水流进染液,使沉渣冲走。
12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
血疟原虫(MP)薄血片检查法(手工法)
1. 实验原理
应用瑞氏染色法对制备好的薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫,并鉴别其形态种类。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采
血;恶性疟患者,应在发作后20h左右采血。
2.2 标本种类:全血或末梢血
2.3 标本要求:薄血片的血膜厚度要适度均匀以利镜检。
3. 标本储存:室温存贮,尽快检查。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染。
6. 操作步骤
6.1 以常法推制成薄片。
6.2 血膜完全干燥后即可进行瑞氏染色。
6.3 在油镜下进行检查。
7. 结果判断与分析
在油镜下观察,进行形态鉴别。薄血片上3种疟原虫形态特点:
体
9. 操作性能:快速简便、操作简单。
10. 方法局限性
10.1 阳性检出率较低。
10.2 存在主观判断的失误。
11. 参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,85-86 12. 注意事项
12.1 染色后,水洗时不要先倒去染液,应让清水流进染液,使沉渣冲走。
12.2注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
12.3 薄片油镜检查,须找出100或100个以上视野才能报告“未检出疟原虫”。12.4找到环状体后,须再仔细寻找更为成熟的阶段,以便分类。如确实未找到更为成熟阶段的疟原虫,可报告为“检出环状体疟原虫”。
12.5 有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时,以间日疟与恶性疟原虫混合感染为常见,须注意鉴别。
尿人绒毛膜促性腺激素胶体金法定性
1. 实验原理
应用由抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)抗体和抗鼠IgG分别固相硝酸纤维膜和胶体金标记的抗HCG单克隆抗体及其他试剂组成,应用层析双抗体夹心法的原理快速检测尿液中HCG。显示结果明确,操作简便。用以妊娠早期诊断。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:无需特殊准备
2.2 标本种类:随机尿
2.3 标本要求:尿液收集应使用一次性尿杯或洁净容器,任何随机尿均适用本实验。
3. 标本储存:如尿液不能及时送检,应置4℃冰箱,测试前注意复温。
4. 标本运输:室温运输
5. 标本拒收标准:细菌污染
6. 试剂
6.1 试剂名称:孕知秀
6.2 试剂生产厂家:蓝十字生物药业(北京)有限公司
6.3 包装规格:条型:1人份/袋
6.4 试剂盒组成:
检测试纸100人份/盒
6.5 试剂储存条件及有效期:室温4-30℃避光密封干燥处贮存,切勿冰冻。有效期17个月。
7. 操作步骤
7.1 待测样品、检测试纸或其他检测用材料等均在室温平衡后取出试纸。
7.2 将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中,至少3秒钟后取出平放,5分钟内观察显示结果。
7.3 测试纸插入尿液深度不可超过MAX标志线。
8. 结果判断与分析
阳性:在检测线位置及对照线位置各出现一条红色反应线。
阴性:仅在对照线位置出现一条红色反应线。
无效:测试纸无红色反应线出现,或仅在检测线位置出现一条红色反应线,表明实验失败或者检测纸失效。
9. 临床意义
9.1 本实验主要用于妊娠的诊断。在受孕2-6天即呈现阳性。
9.2 用于与妊娠相关疾病和肿瘤的诊断及鉴别诊断。
9.3 过期流产或不完全流产,子宫内仍有活胎盘组织时,本实验仍呈阳性。
9.4 人工流产后,如果仍呈阳性,提示宫内尚有残余胚胎组织。
9.5 宫外孕时,HCG低于正常妊娠,仅有60%阳性。
10. 操作性能:快速简便、特异性强、灵敏度高、重复性好。
11. 方法局限性:试纸受潮易失效
12. 参考文献:
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,135-136
13. 其他
13.1 测试纸从冰箱取出后,先充分复温再打开包装,
13.2不要用过期的试剂。
13.3 本品为一次性使用体外诊断试剂。
13.4 当HCG浓度很高时,检测线颜色可能变浅,属正常现象。
13.5 若被测试者仍怀疑有受孕可能,而尿液测试阴性,可在48-72小时后重新收集晨尿再次测定。
13.6 子宫肿瘤、葡萄胎或更年期病人,因尿液中HCG含量较高,可能会出现阳性结果。
13.7 怀疑异位、异常妊娠时,应结合其他方法进行诊断。
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