蛋黄卵磷脂的制备研究

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表5       方差分析结果

方差来源乙醇浓度溶剂用量提取时间总和

平方和(s)1.280.061.663

自由度(f)

2226

均方(s/f)0.6421.330.0310.8327.67

取方法是醇提法。此法的提取工艺简单,条件容易控

F临界值

F0.05(2,2)=19F0.01(2,2)=99F0.1(2,2)=9F0.2(2,2)=4

制,提取率高,提取剂乙醇易除净,所以可将此工艺应用于工业化生产,所生产的提取液可浓缩成膏状物,也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中,作为保健食品、营养食品和功能食品的原料,应用前景良好。

比较了水提方法与醇提法,醇提法效果较好。为全面考查醇提法影响因素,设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的3因素3水平正交试验,结果见表4。

试验结果及方差分析表明:乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件A2B3C2即用25倍量80%乙醇回流2h,影响因素的大小依次为:乙醇浓度、提取时间、溶媒量;此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为12.59%。3

结    论

参考文献:[1][2][3][4][5][6][7]

中科院植物研究所.中国高等植物图鉴(第一册)[M].科学出版社,1972.

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对多穗柯中黄酮类物质的提取,水提法以80℃的恒温水浴,pH值为10的氢氧化钠液提取效果最好。醇提法的正交试验的结果表明:多穗柯中黄酮类物质的最佳提取条件是A2B3C2,即用25倍量80%乙醇回流2h,醇提法提取总黄酮类物质的含量是12.59%。而碱提法色素成分浸出太多。所以,多穗柯中黄酮类物质的最佳提

蛋黄卵磷脂的制备研究

吴晓英,林 影,叶倩君,李晶晶

(华南理工大学生物工程系,广东 广州     510640)

摘   要:研究了鸡蛋卵黄卵磷脂的制备工艺和产品质量分析。结果表明,使用95%乙醇分三次提取粗卵磷脂效果最佳,可制得卵磷脂含量约为70%的粗卵磷脂,得率约为10%;进一步使用ZnCl2沉淀制备卵磷脂效果最佳,使用10% ZnCl2纯化粗卵磷脂的回收率约为80%,产品中卵磷脂含量达94.25%;薄层层析结果表明,卵磷脂产品只有两个明显的斑点,分别为PC及PE两种成分。分光光度法测得卵磷脂的紫外最大吸收峰在215nm波长处。关键词:卵黄;卵磷脂;有机溶剂;金属盐沉淀剂;制备

Study on Preparation and Quality Analysis of Egg Yolk Lecithin

WU Xiao-ying,LIN Ying,YE Qian-jun,LI Jing-jing

(Department of Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou       510640, China)

Abstract: The preparation approach and quality analysis egg yolk lecithin were discussed in this paper. The 70% rough lecithinfrom fresh egg yolk was extracted three times with ethanol  under different conditions and precipitated by acetone. 10% ZnCl2precipitator was used to purify rough lecithin further. About 80% recovery of refined lecithin was obtained, with the content of收稿日期:2003-07-16

phospholipid over 90%. The maximum ultraviolet absorb peak of product occurred at 215nm. The TLC results showed that thelecithin prepared had two clear spots, PC and PE.

Key  words:egg yolk;lecithin;organic solvent;metal salt precipitant;extraction;purification

中图分类号:Q545.1                             文献标识码:A                                        文章编号:1002-6630(2004)05-0115-05

卵磷脂是构成生物体细胞膜的重要成分之一,广泛存在于动植物体内。卵磷脂既是一种重要而安全的食品乳化剂,又是一种保健食品,此外它还广泛应用于临床上心脑血管及肝、肿瘤等疾病的治疗和作为药物载体。

目前,卵磷脂产品主要是从大豆油、菜籽油等植物的水化油脚或动物脑和蛋黄中提取得到的。蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量比大豆磷脂高3倍,而磷脂酰胆碱又是体现磷脂功能性质的主要成分(它是胆碱的重要来源),同时蛋黄卵磷脂的产品纯度高,氧化稳定性较大豆磷脂好,因此蛋黄卵磷脂日益受到人们的关注。蛋黄卵磷脂(广义上的)是一个混合物,主要由卵磷脂 (磷脂酰胆碱,phosphatidylcholines,简称 PC)、脑磷脂 (磷脂酰乙醇胺,phosphatidyl ethanolamines,简称 PE)和鞘磷脂 ( sphingomyelin,简称 SPM)组成。从磷脂含量上可划分为粗蛋黄卵磷脂 (磷脂含量约 30%,一般用作保健品 )和精制卵磷脂 (磷脂含量≥ 90%,主要用于制造静脉营养药脂肪乳 )[1]。

本文在综合国内外文献基础上,通过对蛋黄卵磷脂的最佳制备工艺条件和质量分析进行探讨,希望寻找一条适合工业生产的制备蛋黄卵磷脂的工艺路线。

[2~5]

将一定量卵磷脂粗品溶于适量无水乙醇,加入适量金属盐的水溶液,充分搅拌,得金属盐卵磷脂络合物沉淀,分离沉淀并加适量冰丙酮洗涤,收集沉淀物,真空干燥,可制得白色蜡状的精制卵磷脂。1.2.3

卵磷脂的含量测定

采用消化定磷法[6]测定含磷量,使用系数25将含磷量换算为磷脂的质量[7]。1.2.4

紫外吸收光谱测定[8]

将一定量卵磷脂样品溶于无水乙醇,配成0.1%乙醇溶液,用紫外分光光度计扫描其在190~400nm的吸收光谱,可测得卵磷脂的紫外最大吸收峰。1.2.5

薄层层析分析

将卵磷脂样品与对照品分别配成2%氯仿溶液,用GF250硅胶板进行层析,展开剂为氯仿:甲醇:水(65:25:4),层析完毕后,取出薄板,干燥,碘蒸气显色。22.1

结果与讨论

有机溶剂法提取蛋黄卵磷脂的工艺条件选择

蛋黄由51%水分,14.8%蛋白质,34.6%脂质(胆固醇,甘油三酯,磷脂等)所构成。利用卵磷脂可溶于

11.11.1.1

材料与方法材料与仪器

材料

鲜鸡蛋由华南农业大学种鸡场提供;纯化蛋黄卵磷

脂(含PC 73.4%、PE 15.8%)、纯PC样品、纯PE样品来源于韩国斗山生物技术公司;其他试剂均为市售。仪器

756MC紫外可见光分光光度计     上海精密科学仪器有限公司;RE-52AAA旋转蒸发器     上海嘉鹏科技有限公司;GF250硅胶板     10×20cm,上海信谊仪器厂;ZK-82B真空干燥箱     上海市实验仪器总厂。1.21.2.1

方法

有机溶剂法提取卵磷脂

在一定量鸡蛋卵黄中加入适量95%乙醇,混合搅拌,离心分离,将沉淀物再加入95%乙醇,重复以上步骤多次。收集上清液,减压蒸馏至近干,用少量石油醚溶解,得石油醚溶液,于石油醚溶液中加入丙酮,分离出沉淀物,真空干燥,得淡黄色的卵磷脂粗品。1.2.2

金属盐沉淀剂纯化卵磷脂

1.1.2

乙醇的性质,将卵黄溶于乙醇时,卵磷脂从卵黄中转移到乙醇溶液中,分离提取出来,而且蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。但由于乙醇溶剂抽提时,其它脂质也一起被抽提,如甘油三酯、甾醇、酯等。利用卵磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮处理卵黄或用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂都能使卵磷脂与其它脂质和胆固醇分离开来,故使用丙酮处理是最有效和最常用的一种方法。在进行溶剂萃取时,必须控制好温度、溶剂用量、溶剂浓度、萃取次数等条件和因素。2.1.1

乙醇提取次数的选择

取鸡蛋卵黄用2倍量的95%乙醇提取,室温下搅拌1h,3000r/min离心分离10min后,取上清液进行减压蒸馏,而分离后的沉淀物再用95%乙醇提取,重复以上操作3次,在相同操作条件下将4次上清液分别进行减压蒸馏及丙酮洗涤,最后得到4批粗卵磷脂产品,检测分析其成分,所得的收率及含磷量如图1所示。

含磷量的多少可反映产品的纯度,含磷量越高,产品纯度越高。由图1可见,四次提取所得粗品的含磷量相差不大,其中第二,第三次的含磷量较高,分别有3.75%、3.73%,但是回收率却随提取次数的增加而

减少。如图1所示,第四次提取出的粗卵磷脂量已很少,回收率仅为0.16%。从经济效率上考虑,提取三次就已足够,第四次提取可免去。这样可使工艺流程简单化,经济化,有利于后续步骤的进一步纯化。2.1.2

辅助溶剂的选择

粗提时,卵磷脂的乙醇粗提液置于烧瓶中减压旋转蒸发,在其它操作条件相同的情况下,瓶中粘壁的残馏物若不用另一种有机溶剂进一步溶解,则将会损失一部分的产品,最后卵磷脂粗品回收率只有2.86%。故可采用少量石油醚溶解粘壁的残馏物,使产品能充分回收,卵磷脂粗品回收率大大提高。2.2

利用金属盐沉淀纯化卵磷脂的工艺条件选择

无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀,因此可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来,由此除去蛋白质、脂肪等杂质,再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质,这样可大大提高卵磷脂纯度。

金属离子沉淀剂的选择

在选择金属离子时,不但要考虑其毒害性,还要考虑其价廉易得。Cd2+、Pb2+等重金属离子对卵磷脂也有较好的沉淀作用,但由于其毒害性以及对环境造成的污染,故不予考虑。由此选择了Zn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+四种金属盐进行比较沉淀实验。

将适量粗卵磷脂溶于无水乙醇中,然后分别加入相当于卵磷脂质量的20%的Zn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+的氯化物水溶液。将混合液在室温下搅拌0.5h,让卵磷脂与金属离子充分接触、沉淀,然后过滤并收集沉淀物。加入冰冷丙酮洗涤沉淀物,搅拌1h,过滤,收集沉淀物,干燥,称重,检测。

从图2可见,Zn2+对卵磷脂的沉淀效果较好,卵磷脂回收率有57.01%;且所制得的产品含磷量较高,有3.67%。故选用Zn2.2.2

2+

ZnCl2的水溶液(若直接投加固体,ZnCl2在醇中的溶解度不高,沉淀效果差)。室温下搅拌0.5h,过滤,收集沉淀物。加入冰冷丙酮洗涤沉淀物,搅拌1h,过滤,收集沉淀物,干燥,称重,测定。

2.2.1

如图3所示,可知使用ZnCl2量以 10%为最佳,卵磷脂回收率有80.63%,产品含磷量3.44%。2.3

最佳工艺条件下卵磷脂的制备

室温下,取适量的鸡蛋卵黄用2倍于卵黄体积的

95%乙醇进行提取,混合搅拌,离心分离(3000r/min,5min),将沉淀物重复提取三次,回收上清液;然后减压蒸馏(45℃)至近干,用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物质;加入丙酮,分离出沉淀物,真空干燥(40℃,30min),得到淡黄色的粗卵磷脂,称重。

取一定量的卵磷脂粗品,用无水乙醇溶解,得到约10%的乙醇粗提液,加入相当于卵磷脂质量的10%的ZnCl2水溶液,室温搅拌0.5h;分离沉淀物,加入适量冰丙酮(4℃)洗涤,搅拌1h,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无色止,得到白色腊状的精卵磷脂;干燥;称重。所得结果如表1所示。2.4

薄层层析分析

自制卵磷脂分别与纯化卵黄卵磷脂及纯PC,纯PE

样品对比进行薄层层析分析。

为最适的沉淀剂。

金属离子使用量的选择

确定了ZnCl2为最适沉淀剂,然后讨论ZnCl2的添

加量。将适量粗卵磷脂溶于无水乙醇中,然后分别加入相当于卵磷脂质量的5%、10%、15%、20%、30%

表1      最佳工艺条件下制备卵磷脂的结果

原料(卵黄)

100g

10.06

69.658294.25

总得率(%)8.25

2.5

紫外分光光度法测卵磷脂最大吸收峰

将自制的卵磷脂样品溶于无水乙醇中,浓度为

0.1%,用紫外分光光度计测定其吸收光谱,测得结果如图6所示。卵磷脂紫外最大吸收峰在 215nm波长处,与文献报道一致。

由图4中可知自制卵磷脂经过薄层层析后有两个明显的斑点,Rf值分别是0.42,0.72。纯化卵黄卵磷脂经过薄层层析后也有两个斑点,Rf值分别是0.42,0.74。Ⅰ与Ⅱ斑点的Rf值相似,故可判断两者组成成分相同。

结    论

本研究使用有机溶剂从鸡蛋卵黄中提取卵磷脂、利用金属盐沉淀纯化卵磷脂,研究结果表明,使用95%乙醇分三次提取粗卵磷脂效果最佳,可制得卵磷脂含量约为70%的粗卵磷脂,得率约为10%;使用ZnCl2纯化卵磷脂效果最佳,使用10% ZnCl2纯化粗卵磷脂的回收率约为80%,产品中卵磷脂含量达94.25%;由薄层层析结果表明本研究所制得的卵磷脂只有两个明显的斑点,分别为PC及PE两种成分。分光光度法测得卵磷脂的紫外最大吸收峰在215nm波长处,与文献报道一致。

本研究的工艺路线具有工艺简单、提取效率高、产品纯度高、成本低、生产周期短的特点,为卵黄卵磷脂的生产提供可行性依据。

由图5可知自制卵磷脂经过薄层层析后有两个斑点,Rf值分别是0.49,0.62。纯PC斑点Rf值为0.46,纯PE斑点Rf值为0.62,故由Rf值可判断,自制卵磷脂中Rf值为0.49的斑点是PC,Rf值为0.62的斑点是PE。且根据斑点的大小初步判断自制卵磷脂中PC含量较PE含量高。

[2][3]

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韩轶,周扬,赵永芳. 卵磷脂的提纯、鉴定及应用[J]. 氨基酸和生物资源,2001,23(2):28-31.

[6]

无糖葛根酸奶的工艺研究

张 雁,李健雄,魏振承,池建伟

(广东省农业科学院农业生物技术研究所 国家农业部功能食品重点开放实验室,广东 广州     510640)

摘   要:对具有营养保健功能的无糖葛根酸奶的加工工艺进行了初步探讨。结果表明:以鲜葛根为原料,用0.05%VC+0.1%柠檬酸作为护色剂,可制得色泽洁白,质量良好的葛根汁;采用葛根汁:鲜牛奶=3:7的原料配比,阿斯巴甜0.05%,明胶0.15%,将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌以1:1混合作为发酵剂进行发酵,接种量3%,发酵温度42℃,发酵时间5h等工艺条件,可得到品质风味优良的无糖葛根酸奶。关键词:葛根;无糖酸奶;发酵;加工工艺

Study on Processing Technology of  Puerariae Radix Yoghurt without Sugar

ZHANG Yan,LI Jian-xiong,WEI Zhen-cheng,CHI Jian-wei

(Agro-biotech. Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of

 Functional Food, Ministry of Agriculture, Guangzhou     510640, China)

Abstract :Preliminary investigation on processing technology of no sugar Puerariae Radix yoghurt with nutritional and healthyfunctions was reported. The results showed that good quality and white Puerariae Radix juice could be produced by using 0.05%VC+0.1%CA as color protecting agents. Good quality and tasteful Puerariae Radix yoghurt without sugar could be obtained byadopting following conditions: raw materials ratio of  Puerariae Radix juice and fresh milk as 3:7, and addition of Aspartame0.05%, gelatin 0.15%, fermentation agent of 1:1 mixture of L.bulgaricus and St.thermophilus with inoculation of 3%, fermentationtemperature 42℃ and fermentation time 5h.

Key words:Puerariae Radix;yoghurt without sugar;fermentation;processing technology

中图分类号:TS252.4                               文献标识码:B                                  文章编号:1002-6630(2004)05-0119-04

葛根为蝶形花科(或称豆科)葛属植物的根,是常用的传统中药,并属于我国卫生部公布的药食共有资源,我国的葛根资源丰富,主要有野葛和粉葛两种。现代药理研究表明,葛根素、葛根素木糖甙、金雀异黄素、大豆甙、大豆甙元等异黄酮类化合物是葛根的主要有效成分[1,2],具有促进心脑血管血流、降血脂、降血糖、

降血醇、抗衰老、抗癌、抗疲劳、增强机体免疫力等多种生理功能[2,3],尤其以维护心脑血管健康的作用最为显著[2,3]。

酸奶是一种集营养与保健为一体的乳制品,具有酸甜可口,香气宜人的独特风味,含有大量被誉为“益生菌”的乳酸菌及其分解代谢产物,可有效抑制有害

收稿日期:2003-09-01基金项目:广东省科技计划项目(C20614)

本文来源:https://www.bwwdw.com/article/ti34.html

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