食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定

附件2

食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定

BJS201706

1 范围

本方法规定了食品中氯酸盐和高氯酸盐含量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本方法适用于包装饮用水、液体乳、大米、胡萝卜、哈密瓜、猪肉、鱼肉、茶叶、婴幼儿配方乳粉（不包括特殊医学用途的婴幼儿配方乳粉）中氯酸盐和高氯酸盐的测定。 2 原理

试样经提取、离心后，上清液经固相萃取柱净化，用液相色谱-串联质谱测定，内标法定量。 3 试剂和材料 3.1 试剂

3.1.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 3.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 3.1.3 甲酸（HCOOH）：色谱纯。

3.1.4 甲酸铵（HCOONH4）：液质联用级。 3.1.5 超纯水（H2O）：电阻率为18.2MΩ·cm。

注：以上试剂在使用前均应做本底测试。

3.2 试剂配制

3.2.1 含0.1%甲酸的水溶液：量取1.0mL甲酸（3.1.3）至1000mL容量瓶，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，混匀。

3.2.2 20mmol/L甲酸铵溶液：称取0.63g甲酸铵（3.1.4），用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至500mL，混匀。

3.2.3 甲酸铵甲醇溶液：取100mL甲酸铵溶液（3.2.2），加入200mL甲醇（3.1.2），混匀。 3.3 标准品

3.3.1 氯酸钠标准品：采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99%。中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1。

3.3.2 高氯钠盐标准品：采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99%。中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1。

表1氯酸盐和高氯酸盐的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量

中文名称 氯酸钠 高氯酸钠 英文名称 Sodiumchlorate Sodiumperchlorate CAS登录号 7775-09-9 7601-89-0 分子式 NaClO3 NaClO4 相对分子量 106.44 122.45 3.4 同位素内标

3.4.1 氯酸盐同位素内标：氯酸盐-18O3（200μg/mL，以氯酸根-18O3离子计，北京振祥提供，EURL-SRMLotNo:024），4℃保存。

3.4.2 高氯酸盐同位素内标：高氯酸盐-18O（以高氯酸根-18O4离子计，美国剑桥提供，4100μg/mL，CILOLM-7310-1.2），4℃保存。 3.5 标准溶液的配制

3.5.1 氯酸盐标准储备液（1mg/mL，以氯酸根计）：精密称取氯酸钠0.128g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL标准储备液，4℃保存。

3.5.2 高氯酸盐标准储备液（1mg/mL，以高氯酸根计）：精密称取高氯酸钠0.123g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL标准储备液，4℃保存。

3.5.3 混合标准中间液：分别准确量取0.2mL氯酸盐标准储备液（3.5.1）、0.1mL高氯酸盐标准储备液（3.5.2），置于同一100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为2.0μg/mL、1.0μg/mL的混合标准中间液，4℃保存。

3.5.4 混合同位素内标液：分别准确量取75μL氯酸盐同位素内标（3.4.1）、20μL高氯酸盐同位素内标（3.4.2）置于同一10.0mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐-18O3、高氯酸盐-18O4浓度分别为1500ng/mL、200ng/mL的混合同位素内标液，4℃保存。

3.5.5 混合标准工作溶液：分别准确量取混合标准中间液（3.5.3）0μL、10μL、25μL、50μL、75μL、100μL、250μL、500μL、750μL、1000μL，及混合同位素内标液（3.5.4）100μL，用甲酸铵甲醇溶液（3.2.3）稀释并定容至10mL，作为混合标准工作溶液S0、S1—S9。氯酸盐浓度依次为：0.00ng/mL、2.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、15.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、150ng/mL、

200ng/mL，高氯酸盐浓度依次为：0.00ng/mL、1.00ng/mL、2.50ng/mL、5.00ng/mL、7.50ng/mL、10.0ng/mL、25.0ng/mL、50.0ng/mL、75.0ng/mL、100ng/mL，混合标准工作液中氯酸盐-18O3、高氯酸盐-18O4浓度分别为15.0ng/mL、2.0ng/mL，或依需要配制适当浓度的混合标准工作液。临用新制。 4 仪器和设备

4.1 液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源）。 4.2 涡旋振荡器。 4.3 组织捣碎机。 4.4 均质器。

4.5 离心机：转速≥10000r/min。

4.6 电子天平：感量分别为0.0001g和0.001g。 4.7 超声波恒温水浴振荡器。 4.8 具塞离心管：50mL。

4.9 PRiMEHLB固相萃取柱：3cc，150mm，或性能相当者。

注：4.8、4.9的耗材在使用前均应做本底测试。

5 试样制备与保存 5.1 包装饮用水

充分混匀，直接取用。 5.2 液体乳：

充分摇匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于4℃避光保存。 5.3 猪肉、鱼肉：

取适量有代表性的可食部分试样，切成小块，组织捣碎机捣碎，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于-18℃避光保存。 5.4 胡萝卜、哈密瓜：

取适量有代表性的试样，去皮去籽，切成小块，组织捣碎机捣碎，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于-18℃避光保存。 5.5 婴儿配方乳粉：

充分混匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。 5.6 大米、茶叶：

取适量有代表性的试样，粉碎机粉碎后过40目筛，均分成两份，作为试样和留样，分别装入

洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。 6 测定步骤 6.1 提取

6.1.1 包装饮用水：

准确移取1.0mL试样，加入10.0μL混合同位素内标液（3.5.4），涡旋震荡10s，经0.22μm再生纤维素滤膜过滤后，取续滤液供液相色谱-串联质谱仪测定。 6.1.2 胡萝卜、哈密瓜、茶叶：

准确称取1g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），涡旋振荡5min，再准确加入13.0mL甲醇（3.1.2），混匀，振荡超声提取30min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。 6.1.3 大米：

准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），涡旋振荡5min，再准确加入13.0mL甲醇（3.1.2），混匀，振荡超声提取30min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。 6.1.4 婴儿配方乳粉：

准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入150μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入5.0mL0.1%甲酸水溶液（3.2.1），迅速混匀，置于45℃水浴超声20min，涡旋振荡5min，再准确加入10.0mL甲醇（3.1.2），混匀，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。 6.1.5 液体乳：

准确称取5g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入150μL混合同位素内标液（3.5.4），加入1.0mL0.1%甲酸水溶液（3.2.1），9.0mL甲醇（3.1.2），涡旋振荡5min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。 6.1.6 猪肉、鱼肉：

准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），13.0mL甲醇（3.1.2），10000r/min均质30s，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。 6.2 净化

吸取约3.0mL上述上清液（6.1.2~6.1.6），按附录A中的图A.1方式过固相萃取柱（4.9）及0.22μm再生纤维素滤膜，弃去约1mL流出液，收集续滤液，供液相色谱-串联质谱仪测定。 6.3 色谱测定

6.3.1 液相色谱-串联质谱检测 6.3.1.1 参考液相色谱条件

a)色谱柱：AcclaimTRINITYP1复合离子交换柱（50mm×2.1mm，3μm；100mm×2.1mm，3μm），或性能相当者。

b)流动相：A为乙腈，B为20mmol/L甲酸铵溶液。梯度洗脱程序见表2。 c)样品系列运行完后，按表3的色谱柱清洗梯度程序对色谱柱进行清洗。 d)流速：0.5mL/min。 e)柱温：35℃。 f)进样量：3μL。

表2梯度洗脱程序

50mm×2.1mm，3μm规格色谱柱 时间(min) Initial 0.5 4.0 5.0 7.0 8.0 流动相A(%) 35 35 65 90 90 35 流动相B(%) 65 65 35 10 10 65 100mm×2.1mm，3μm规格色谱柱 时间(min) Initial 0.2 3.0 7.0 8.0 10.0 流动相A(%) 70 70 90 90 70 70 流动相B(%) 30 30 10 10 30 30 表3色谱柱清洗梯度程序

50mm×2.1mm，3μm规格色谱柱 时间(min) Initial 10.0 100.0 流速(mL/min) 0.5 0.15 0.15 流动相A(%) 35 90 90 流动相B(%) 65 10 10 时间(min) Initial 15.0 150.0 100mm×2.1mm，3μm规格色谱柱 流速(mL/min) 0.5 0.15 0.15 流动相A(%) 70 90 90 流动相B(%) 30 10 10 注：色谱柱按该程序清洗后保存，有助于延长色谱柱寿命。 6.3.1.2 参考质谱条件

a)离子源：电喷雾离子源（ESI源）。 b)检测方式：多反应监测（MRM）。 c)扫描方式：负离子模式扫描。 d)毛细管电压：200V。 e)锥孔电压：60V。 f)脱溶剂温度：500℃。 g)脱溶剂气流量：1000L/h。 h)锥孔气流量：150L/h。

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