食品生物技术细胞工程复习题

复习题

一、 名词解释

细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学的理论、方法和技术，按人的设计，有计划地大规模培养组织或细胞以获得生物产品，或改变细胞的遗传物质以产生新的物种或品系。

组织培养：是指从机体内取出组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外进行培养，使之生存或生长成组织．

细胞培养：是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织． 细胞全能性：细胞具有发育成完整个体的潜能．

细胞融合：两个或多个细胞相互接触后，其细胞膜发生分子重排，导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程

植物细胞培养：是指在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行振荡培养，得到分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术．

原代培养：从供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养。

外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织、器官、细胞和原生质体等。 愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 继代：将愈伤组织重新转移到成分相同的新鲜培养基上的过程

接触抑制：细胞从接种到长满底物表面后，由于细胞繁殖数量增多相互接触后，不再增加。 贴壁细胞传代培养：当原代培养的细胞相互汇合时，细胞由原培养瓶消化、收集、稀释后传到新的培养瓶的过程。

细胞系：原代细胞经第一次传代后，形成的细胞群体，即具有增殖能力，类型均匀的培养细胞，一般为有限细胞系。

细胞株：细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的细胞群体。

细胞克隆：即把一个单细胞从一个群体中分离出来单独培养，使之重新繁衍成为一个新的细胞群体的培养技术。

原生质体融合：除了动物细胞因没有细胞壁可以直接用于融合外，植物细胞和微生物细胞常因有细胞壁不能直接用于融合，必经酶法除去细胞壁而得原生质体而后再进行融合，这种融合称为．．．．． 融合子或融合重组子：原生质体融合后，来自两亲本的遗传物质经过交换并发生重组而形成的子代．

L型细菌：专指那些在实验室中通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。 遗传互补筛选法：利用每一亲本贡献一个功能正常等位基因，纠正另一亲本的缺陷，令杂种细胞表现正常。

抗性互补筛选法：利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其它有毒物质抗性差异选择杂种细胞。

细胞拆合：是指以一定的实验技术从活细胞中分离出细胞器及其组分，然后在体外一定条件下将不同细胞来源的细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器．

染色体转移 ：把同特定基因表达有关的染色体或染色体片段转入受体细胞，使该基因得以表达．

动物细胞培养：指离散的动物活细胞在体外人工无菌条件下的生长增殖，在整个过程中细胞不出现分化，不再形成组织．

单层附壁培养：从生长表面脱落进入液体的细胞通常不再生长而逐渐退化，这种细胞培养称为……

二、填空题

1.生物细胞全能性大小 受精卵___，卵细胞（生殖细胞） ， 体细胞 ___。（从大到小）

2.细胞具有全能性是由于生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的 全套遗传物质 ___，都有发育成完整个体所必需的 全部基因 ___。

3.生物体内的细胞不表现全能性是由于 选择表达结果 ，植物细胞离体状态表现 全能性__。

4.植物细胞工程的基本操作过程是 细胞培养 __， 破壁获原生质体 ， 融合 ， 筛选 ___。

5.选择和配制培养基的四个原则 目的明确_， 营养协调__， 条件适宜 ， 经济节约 ___。

6.培养基根据微生物的种类来分类 细菌 _，（牛肉膏蛋白胨培养基）； 放线菌__，（高氏一号培养基）； 酵母 ，（麦芽汁培养基）； 霉菌_，（ 查氏合成培养基）。 7.植物细胞的连续培养分为 封闭型连续培养_， 开放型连续培养__， 化学恒定式 ， 浊度恒定式___。

8.获得植物细胞同步培养的方法有 体积选择法_， 冷处理法__， 饥饿法 ， 抑制法 ， 有丝分裂抑制法 _。

9.动物细胞根据贴壁型生长特征分为__成纤维细胞型 __，___上皮细胞型_ __，___游走细胞型 __，__多形细胞形 __。

10. 下图是用萝卜根组织培养的某些过程示意图，请据图回答： 下图是用萝卜根组织培养的某些过程示意图，请据图回答：

(1)请把组织培养的过程按正常顺序排列（以字母表示）_BDCA____________。

(2)图D上的细胞团是_愈伤组织__________，它的特点是__具有分生能力的薄壁细胞____ ______。

(3)图C和图D的培养基分别是____分化培养基__________和 诱导培养基 培养基。

(4) 从原理上讲，植物细胞有形成再生植株的可能性，这是__植物细胞的全能性______的表现。

11. 将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。测定各细胞株中人体所具有的五种酶的科学研究性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第 6 、 1 、 2 、 7 和 8 号染色体上。

细胞株 A株 B株 C株 人染色体编号 1 2 + + + + + － 3 + 4 5 6 7 8 + － － － － + － － － + － － － + + － +

12. 紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。右图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。

（1）在生产前，需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培养技术，将紫草叶肉细胞经过 脱分化 而获得的。这项技术的理论基础是 细胞全能性 。

（2）从图中可以看出：反应器中紫草细胞的生长呈现 S 规律；影响紫草素产量的因素是 细胞的数量 和 细胞所处的生长期 。

（3）在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是 保证氧气供应充足 和 使细胞与培养基充分接触 。

13.植物组织培养的培养基中加有激素。下表是培养基中两种植物激素在不同比例时的实验结果。请分析回答：

实验组别 激素种类及浓度关系 结果 1 6—BA 组织块产生 愈伤组织 2 6—BA>IBA 愈伤组织分 化出芽 3 6—BA=IBA 愈伤组织不 断生长 4 6—BA

（2）IBA属于 生长素 类激素，它在本实验中的作用是 促进生根 。

（3）在植物组织培养中，脱分化可 用的激素组合是实验 1 和实验 3 中的激素浓度关系，再分化时可用的激素组合是实验 2 和实验 4 中的激素浓度关系。

（4）植物组织培养的培养基中，除激素外，还必须含有 一定的营养物质 ，它的成分至少应该含有 有机物 、 无机物 等。

（5）判断愈伤组织是否产生，依据是看是否产生了 排列疏松、无定形的薄壁 的细胞。

14. 我国第一只转基因牛“滔滔”的培育程序如右图所示。请回答问题：

(1)写出图中所示细胞工程名称：

b___指体外受精______ c_____指显微注射法_____ d____指胚胎移植______ (2)培育转基因牛“滔滔”的技术路线中关键环节是 ( B ) A．b B．c C．d D．e

(3)从遗传学原理说明基因牛“滔滔”与亲本甲、乙的最根本的区别是什么? 转基因牛“滔滔”中含有外源基因

(4)用什么方法鉴定出生的动物是否整合了外源基因?

分子生物学测定法

(5)如果要使出生的动物整合率在理论上提高到100％，那么在什么时候鉴定? 在胚胎移植前对外源基因在胚胎体内是否已经整合作分子生物学鉴定，从中挑选出有外源基因的整合胚胎进行移植

14.制备植物单细胞的方法有 机械法__， 酶解法 _，愈伤组织诱导法___。

15. 某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。

请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。

（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是___________。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是____________________________。

（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。

（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_____________。 （5）已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A．B两组，A组细胞培养液中加入___________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A．B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的________或_______合成水平的差异，确定Y的药效。

（要设计的实验是要实验抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，所以A、B两组肯定是一组加入Y，一组不加；而肿瘤细胞与一般细胞之间的在合成水平上的差异在于肿瘤细胞会合成较多的蛋白质，同时也会形成较多的mRNA）

答案：（1）多（2）血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液pH（3）停止 多 胰蛋白酶（4）抗生素 （5）Y mRNA 蛋白质

16.叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可以用以下图解简单表示。 (1) 图解中“酶解”所用的酶应该包括 和 。 (2) DPD培养基的成分中，除了各种营养成分外，还必须含有 、 才能获得愈伤组织。

(3) 获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列哪些实验最合适

A．观察原生质体的结构是否完整 B．观察细胞质流动 C． 观察细胞有丝分裂

(4) 一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，利用25％蔗糖

溶液以及其他用具，通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

答案：(1)纤维素酶和果胶酶 (2)生长素 细胞分裂素 (3)B (4)植物细胞的质壁分离与复原

17. 下图所示为农作物新品种的育种方式：

（1）图示育种方式涉及到的生物工程技术有___________、____________。 （2）②③过程分别称为__________、____________。

（3）⑤过程中常用的运载体是_______。⑤过程表示的基因操作步骤是__________、___________。

（4）上述育种与传统杂交育种相比，具有的突出优点是__________。

答案：（1）基因工程、植物体细胞杂交；（2）脱分化、再分化；（3）质粒 目的基因和运载体结合 将目的基因导入受体细胞；（4）实现遗传物质的定向改变、克服了远源杂交不亲积的障碍（和周期短）

18.禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势，有些国家还出现了人感染的病例。现在，科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1亚型禽流感病毒（一种RNA病毒）。 若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体，请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题： （1）若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自___________体内的某种___________细胞，促进d过程的常用诱导剂是___________或_____________。

（2）假设仅考虑某两种细胞的融合，则可形成_______

种类型的C细胞，因此需用_______

培养基筛选出既具有骨髓瘤细胞的________特点，又具备淋巴细胞的___________特点。 （3）_______________技术是单克隆抗体技术的基础。

（4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_______________。 （5）淋巴细胞是由动物体的_____________中的________________分化发育而来。 （6）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_____________________ （1）感染病毒的动物或人 浆 聚乙二醇（PEG） 灭活的病毒 （2）3 选择 能无限增殖 能产生特异性抗体 （3）动物细胞培养 （4）化学性质单一，特异性强 （5）骨髓 造血干细胞 （6）主动运输

18. 应用动物细胞培养技术也可以用于检测能引起染色体变异的有毒物质。现有一种化学物质，不能确定其是否有毒性，请利用动物细胞培养技术设计一个实验来进行研究。 实验及用具：略 实验步骤：

①取幼龄动物的胚胎，剪碎后用胰蛋白酶处理，得到_______________的胚胎细胞； ②配制动物细胞悬浮液；

③______________________________________________________________________； ④_____________________________________________________________________； 将A、B两个培养瓶放入动物细胞培养箱中培养一段时间；

⑤分别从A、B培养瓶中取出细胞用龙胆紫溶液染色，制作临时装片，在显微镜下观察________________________________________________________________________。 预测实验结果，得出实验结论（略）。

①分散 ③将动物细胞悬浮液分装到两个培养瓶中，编号A、B ④向A瓶中加入一定量的待测物质，B瓶中加入等量的生理盐水 ⑤染色体结构与数目（形态）变异的细胞，并计算变异

细胞占全部细胞的百分比

19. 下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

（1）若A、B是动物细胞，通常用_______处理获得分散的单个细胞。

（2）若该过程应用于单克隆抗体的制备，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞

之前，小鼠需注射______。图中D是________，培养该细胞获得的传代细胞称为_________。

（3）若A、B来自植物细胞，则之前已用________法去除细胞壁获得原生质体。常用来

诱导融合的化学试剂是_________。

（4）若A为番茄原生质体，B为马铃薯原生质体。可以应用植物组织培养技术把D培

养成植株，其理论基础是_____，植物体细胞杂交技术可以培养新品种，其突出的优点是____________.

（1）胰蛋白酶 （2）抗原 杂交瘤细胞 细胞系

（3）酶解 聚乙二醇（PEG） （4）细胞的全能性 克服远源杂交不亲合的障碍 三、选择题

1、在动物细胞培养过程中，遗传物质肯定发生改变的细胞是 A．传代培养至50代以后的细胞 B．原代培养细胞 C．传代培养至10代以内的细胞 D．克隆的细胞

2、英国科学家维尔莫特首次用羊的体细胞(乳腺细胞)成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是

A．将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔子宫内，并最终发育成两只一样的兔 B．将人的抗病毒基因嫁接到烟草的DNA分子上，培育出具有抗病能力的烟草新品种 C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

D．将人的精子与卵细胞在体外受精，受精卵在试管内发育 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是 A、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中

B、动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C、动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白 D、动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理

4、某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的有几处

比较内容 特殊处理 融合方法 典型应用 培养基区别 植物细胞工程 酶解法去除细胞壁 物理方法、化学方法、生物方法 人工种子、种间杂种植物 麦芽糖是离体组织赖以生长的成分 动物细胞工程 用胰蛋白酶处理后制成细胞悬浮液 物理方法、化学方法 单克隆抗体的制备 动物血清不可缺少 D．4处5、下列不能作为植A．1处 B．2处 C．3处 物组织培养的材料是 A．秋海棠的叶

B．马铃薯的块茎

C．成熟的花粉 D．木质部中的导管细胞

6、用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是（ ）

A. 该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B. 该愈伤组织的细胞没有全能性

C. 该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成

D. 该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构

7、将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ ） A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素 C. 离体状态 D. 导入指示基因

8、下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A. 植物细胞融合必须先制备原生质体

B. 试管婴儿技术包括人工授精和胚胎移植两方面

C. 经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 D. 用于培养的植物器官或组织属于外植体

9.为研究微生物群体生长规律，常将少量的某种细菌接种到培养基中，定时取样测定培养基里的细菌数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，得到生长曲线，对培养基的要求是

A.恒定容积的液体培养基

B.恒定容积的半固体培养基

C.任意容积的液体培养基 D.任意容积的半固体培养基

10.在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，因为 A．细胞丧失了全能性

B．基因的表达具有选择性

C．不同的细胞内基因不完全相同

D．在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化 11.下列能使烟草、大豆的原生质体发生融合的是

A．硫酸二乙酯 B．亚硝酸 C．振动 D．紫外线

12.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的

A．消毒灭菌 B．适宜的温度 C．充足的光照 D．适宜的养料和激素 13、植物体细胞杂交尚未解决的问题是

A．去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体

B．将杂种细胞培育成植株

C．让杂种细胞培育成的杂种植株按照人们的需要表现出亲本的性状 D．尚未培养出属间杂种植株

14、与传统的有性杂交相比较，植物体细胞杂交的最大优点是 A．可以使两个亲本的优良性状组合在一起 B．可以克服远缘杂交不亲和的障碍 C．可以培育出高产性状明显的新品种 D．可以降低生产成本提高经济效益 15、下列属于组织培养的是

A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条

C．根尖分生区发育成成熟区 D．未受精的卵发育成个体 16、植物体细胞融合完成的标志是

A．产生新的细胞壁 B．细胞膜发生融合

C．细胞质发生融合 D．细胞核发生融合

17、将烟草和大豆的原生质体混合后，将原生质体转移到适当的培养基上培养，使原生质体再生出细胞壁，这时，在细胞混合物中，可用显微镜观察到的细胞有

①烟草—大豆杂种细胞②烟草细胞③大豆细胞④烟草—烟草细胞⑤大豆—大豆细胞 A．① B．①②③ C．①④⑤ D．①②③④⑤

18、植物体细胞杂交是利用不同物种的两个体细胞融合成一个杂种细胞的过程。该过程是指 A．不同植物的精子与卵细胞的融合 B．不同种植物的原生质体的融合 C．完整的两个体细胞的融合 D．植物花粉细胞的两两融合 19、利用植物组织培养技术能大幅度提高粮食产量的原因是

A．改变了作物品种 B．培养周期短、繁殖率高 C．无性繁殖，保持了亲本的性状 D．有利于提高光合效率

20、人参皂甙干粉通常可以通过下列何种技术方法获得

A．植物组织培养 B．基因工程 C．植物体细胞杂交 D．发酵工

21、下列有关原生质体的叙述中，正确的是

①组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸②原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质③被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体④原生质体只能用于植物细胞工程 A．①③ B．①② C．③④ D．①④ 22、关于愈伤组织形成过程的叙述正确的是 A．愈伤组织的形成是离体的植物细胞分化的结果 B．愈伤组织的形成是离体的植物细胞分裂的结果 C．愈伤组织的形成是离体的动物细胞分化的结果 D．愈伤组织的形成是离体的动物细胞分裂的结果 23、单倍体是指体细胞中

A．含有一个染色体组 B．含有奇数条染色体

C．含有奇数个染色体组 D．含有本物种配子染色体数目

24、A种植物细胞（基因型为Aa），B种植物细胞（基因型为Bb）；去掉细胞壁后，诱导两种细胞的原生质体融合，形成单核的杂种细胞。若经过组织培养得到的杂种植株是

A．二倍体，基因型为AaBb B．二倍体，基因型为AAaaBBbb C．四倍体，基因型为AaBb D．四倍体，基因型为AAaaBBbb

25、运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是

①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A．①②③ B．①②④ C．①③④ D．①②③④ 26、下列技术培育出的新个体中，遗传物质只来源于一个亲本的是

①细胞和组织培养 ②细胞融合 ③扦插 ④诱导产生多倍体 ⑤杂交育种 ⑥动物胚胎移植 ⑦哺乳动物体细胞克隆 ⑧转基因工程 A、①②④ B、②④⑤ C、①③⑦ D、⑤⑥⑧ 27、植物细胞表现全能性的必要条件

A给予适宜的营养与外在条件 B导入其它植物细胞的基因

C脱离母体后，给予适宜的营养与外在条件 D将成熟植物的细胞核移植到去核的卵细胞 28、植物体细胞杂交可以解决不同生物之间的什么问题 A亲缘关系远 B生殖隔离 C地理隔离 D组织分化 29、动物细胞培养的正确过程是

A原代培养——传代培养——细胞株——细胞系 B原代培养——传代培养——细胞系——细胞株 C传代培养——细胞系——原代培养——细胞株 D原代培养——细胞系传——代培养——细胞株 30. 植物组织培养是建立在___理论基础上的。

A进化论 B植物细胞全能性 C基因决定论 D细胞多样性 31、不是植物原代培养的必须步骤是___。 A将外植体高压高温灭菌。

B用消毒过的器械将外植体置于培养皿上。 C切取所需的外植体。

D将外植体接种于培养容器的培养基上。

32. 继代培养的小苗必须经过___才能大规模种植。 A育肥 B打农药 C炼苗 D充分供水 32. 植物组织培养的培养基不含___。 A含N物质 B碳源 C血清 D生长激素

33. 过滤除菌适用对象___。

A玻璃器皿 B塑料器皿 C金属器皿 D易被高温破坏的材料如抗生素、糖、激素等试剂 34.常用动物细胞消化液有___。

A磷酸酶 B胰蛋白酶或胶原酶溶液 C脂酶 D淀粉酶 35.1992年，世界首例转基因小鼠就是通过___法获得的。 A病毒载体 B电脉冲 C基因枪 D脂质体

36. 将___重新转移到成分相同的新鲜培养基上生长的过程称为继代培养。 A外殖体 B愈伤组织 C 生根苗 D 幼苗

37. 从组织中分离的原代培养物经___次传代培养成功后即成细胞系。 A一次 B二次 C三次 D四次

38. 植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（ ）

A.植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B.细胞壁使原生质体失去活力 C.细胞壁阻碍了原生质体的融合 D.细胞壁不是原生质的组成部分 39. 下列属于组织培养但不是克隆的是 （ ）

A．将花粉离体培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条

C．根尖分生区发育成成熟区 D．上皮细胞无性繁殖产生的细胞群

40. 下图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，应分别选用编号是的 （ ）

A．④② B．③② C．③④ D．④③

41.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 （ ）

A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体

C．用于保存物种 D．改变动物的基因型

42.在植物体细胞杂交过程中，常用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。这是因为（ ）

A.纤维素酶和果胶酶容易制取 B.细胞壁的主要成分是纤维素和果胶 C.纤维素酶和果胶酶的成本低 D.纤维素酶和果胶酶的催化能力强

43. 将若干番茄和马铃薯的原生质体混合，用聚乙二醇处理后，转移到培养基上培养，使原生质体再生出细胞壁。这时在培养基上的细胞类型有（ ）

①番茄细胞 ②马铃薯细胞 ③番茄－马铃薯细胞 ④番茄－番茄细胞 ⑤马铃薯－马铃薯细胞

A.①②③ B.③④⑤ C.①②④⑤ D.①②③④⑤ 44. 植物体细胞杂交过程中，细胞融合成功的标志是（ ） A.细胞膜发生融合 B.细胞质发生融合 C.细胞核发生融合 D.形成新的细胞壁 45.与有性杂交相比，植物体细胞杂交的优点是（ ）

A.实现两个亲本优良性状的完全组合 B.打破生殖隔离，实现远源杂交 C.实现遗传性状的定向改变 D.降低科研成本，提高经济效益 46. 下列关于细胞工程的叙述，不正确的是 ( ) A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理

47. 某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是 ( ) A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理

B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象 D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒

48.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 ( ) A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体（能产生抗体细胞应为浆细胞而不是效应T细胞）

B.培养中的人B细胞能够无限地增殖（瘤细胞才具有无限增殖的特点）

C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株（人成熟的红细胞，因无细胞核所以进行细胞培养不能形成细胞株）

D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞

49.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是 ( ) A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位

B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术 C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选

D.只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂-交 细胞

50.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是 ( )

A.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体 B.植物体细胞杂-交培育出的新品种一定不是单倍体

C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织

D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得 交瘤细胞

51.用a表示骨髓瘤细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为 ( )

A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养 B.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养 C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养 D.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养

52.以下四种细胞工程技术中培育出的新个体，只有一个亲本遗传性状的方法是 ( ) A.植物组织培养

B.细胞融合（植物组织培养的过程是无性生殖的过程，形成的新个体中只有一个亲本的遗传物质）C.动物胚胎移植 D.细胞核移植

53.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 ( ) A.AAaa B.AaBb

C.Aabb D.BBbb

54.在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是( )。

A.卵细胞大，便于操作

B.卵细胞含有的营养物质多

C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D.重组细胞才具有全能性

55. 以下不能说明细胞全能性的实验是

A．菊花花瓣细胞培育出菊花新植株 B．紫色糯性玉米种子培育出植株 C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株 56. 玉米是一种重要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家在玉米育种中和栽培中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程，据图判断下列说法中错误的是（ ）

A．从繁殖原理上分析，A→D属于无性生殖

B．植株D和G中的染色体组数不同

C．E→G不能体现细胞的全能性

D．E→F过程中获得的植株一般没有直接的使用价值即应用于大田生产。

57. 在下列各种细胞工程技术培育生物新产品，操作

过程中不可能形成愈伤组织的技术是

A．细胞和组织培养 B．植物细胞融合 C．动物克隆 D．细胞核移植 58. 下列关于动物细胞培养的有关叙述中正确的是 （ ）

A．细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中

B．动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C．动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白

D．动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理 59. 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的( )

A.有丝分裂 B.分化 C.减数分裂 D.全能性 60. 细胞工程是一门综合科学技术，下列哪项技术不属于细胞工程( )

A.有性杂交 B.体细胞杂交 C.组织培养 D.细胞核移植 61. 植物细胞表现出全能性的必要条件是( ) A.导入其他植物细胞的基因

B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中 C.用适当浓度的秋水仙素处理

D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件 62. 下列哪些技术或过程与试管婴儿的形成有关( ) ①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④正常妊娠

A.①③ B.②③ C.①②③ D.①②③④ 63. 下列哪一项属于克隆 ?( )

A.将鸡的某个DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上 B.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内

C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞 D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系

64. 要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要的措施是（ ） A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态

C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素 65. 下列各项叙述中，错误的是（ ）

A.效应B细胞和骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞后，经选择、培养就可以产生单克隆抗体 B.接种过SARS疫苗的动物不再感染SARS病毒，是因体内已经形成该病毒的记忆细胞 C.信使RNA分子的碱基数量大约是相应基因内含子碱基数量的1/2 D.以信使RNA为模板，通过逆转录，就可以获得目的基因的一条链

66.下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是( )

A.诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段完全相同 C.所采用的原理完全相同 D.都能形成杂种细胞

67. 植物体细胞杂交可以解决不同生物之间的______________________问题（ ） A.亲缘关系远 B.生殖隔离 C.地理隔离 D.组织分化 68. 表现型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛。产生这一结果最可能的原因是（ ） A.试管动物培养 B.胚胎移植 C.胚胎分割移植 D.受精卵移植 69. 下面为植物组织培养过程的示意图：

??④ ①????②????③?对上图的下列叙述，错误的是( )

A.将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮即可获得人造种子 B.植物组织培养所依据的生物学原理为细胞的全能性 C.③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段

脱分化再分化D.②→③的再分化过程中，细胞的分化程度逐渐增大

70. 动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于( ) A.培养基不同

B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能

D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株

71. 生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，这是因为( ) A.细胞丧失了全能性

B.基因的表达具有选择性

C.不同的细胞内基因不完全相同

D.在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化

72. 植物体细胞杂交是利用不同物种的两个体细胞融合成为一个杂种细胞的过程。该过程是指( )

A.不同植物的精子与卵细胞的融合 B.不同植物的原生质体的融合 C.完整的两个体细胞的融合 D.植物花粉细胞的两两融合

73. .①试管婴儿、②试管苗、③克隆羊，这三者可以说是现代生物科学的杰出成果，它们的诞生所依据的生物学原理最接近的是（ ）

A.①② B.②③ C.①③ D.①②③ 73. 下列关于细胞工程的叙述中，错误的是

A.植物细胞融合必须先制备原生质体

B.试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面

C.经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 D.用于培养的植物器官或组织属于外植体

74 下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是

A．培养液通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、生长因子和动物血清等 B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞

C．动物细胞培养一般能够传到40—50代，其遗传物质没有发生改变 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞

75. 下面为制备单克隆抗体过程示意图，相关叙述错误的是

A．④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞

B．②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质 C．上图中有一处明显错误 D．⑤可以无限增殖

76. 小鼠体细胞含40条染色体，用小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，然后放入被35P标记的培养液中培养，当杂交瘤细胞进入有丝分裂后期时，其含有的被35P标记的染色体条数是 A．40 B．80 C．120 D．160

77. 下列关于植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是 A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性

B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂

78. 下列不属于动物细胞工程应用的是 A．大规模生产干扰素，用于抵抗细菌产生的外毒素 B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞

C．大规模生产单克隆抗体 D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖

79. 近20年来，在细胞融合和染色体技术的基础上建立了一种“早熟染色体凝集”技术。研究发现，处于细胞分裂期的细胞内含有的促进染色质凝集的物质——有丝分裂因子，能诱导分裂间期的细胞染色质提前凝集成染色体。利用这一技术，可以在光学显微镜下直接观察间期细胞中染色质结构的动态变化。下列说法正确的是 ①该实验需要通过细胞培养获得细胞分裂期和分裂间期的细胞 ②培养动物细胞时，培养液中需加入动物血清 ③收集动物细胞时，需要采用胰蛋白酶溶液处理

④培养分裂期细胞的培养液中需加入一定浓度的秋水仙素 A．①②③

B．②③④

C．①②④

D．①③④

80. 培养人细胞与小鼠细胞的融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶，下列有关叙述中，不合理的是 A．与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变 B．研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术 C．在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组 D．这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系

81. 由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是 A．“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成 B．“弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成 C．“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D．“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的

82. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 A．诱导融合的方法完全相同

B．所用的技术手段基本相同

C．所采用的原理完全相同 D．都能形成杂种细胞

83. 胚胎移植技术目前主要应用于

①解决某些不育症者的生育 ②治疗某种遗传病 ③提高良种家畜的繁殖力 ④提高动物的抗病力培养无病毒感染的动物

A .①② B．③④ C．②④ D．①③

84. 生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野 驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是 （ ） A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

85. 对细胞全能性的表述正确的是

A.非离体植物细胞能够表现全能性 B.动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现

C.单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D.花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现

86. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 A.动物细胞培养的理论基础是细胞全能性 B.动物细胞培养可用来检测苏丹红毒性

C.动物细胞所用的培养液可用来培养禽流感病毒

D.原代培养的动物细胞一般传代至10代左右就不容易传下去了，但极少数细胞可度过这次“危机”，这种传代细胞可无限传代。 87. 下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是

A.特异性强、灵敏度高 B.体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 C.与抗癌药物结合可制成“生物导弹” D.由浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌

88. 试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，它们

A.都属于无性生殖能保持母本性状 B.都是细胞工程的技术范围 C.都充分体现了体细胞的全能性 D.都不会发生基因重组和变异 89. 下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是

A.培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B.原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C.细胞株一般能够传到40~50代，但其遗传物质发生了改变 D.在培养条件下可以无限分裂的细胞叫作细胞系

90. 基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 91. 下列关于愈伤组织的说法中不正确的是

A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂 B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用 C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料 D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质

92. 既可用于基因重组技术又可用于细胞融合技术的是

A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 93. 通过特定方法，利学家将小鼠和人已分化的体细胞成功地转变成了类胚胎干细胞。有关分化的体细胞和类胚胎干细咆的叙述．正确的是

A．类胚胎干细胞能够分化成多种细胞 B．分化的体细胞丢失了某些基因 C．二者功能有差异，但形态没有差异 D．二者基因组相同，且表达的基因相同 94. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括

①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植

A．①② B．①③ C．②③ D．③④

95. 某小鼠的癌细胞具有氯霉素抗性，通过细胞核移植技术，将无氯霉素抗性的小鼠体细胞核取出，注入去核的小鼠癌细胞中，然后将这一重组细胞培养在含有氯霉素的培养基中，结果发现，该重组细胞不能分裂生长。这一实验可以说明：

A.该重组细胞具有氯霉素抗性 B.氯霉素抗性属于细胞核遗传 C.该重组细胞可称为细胞株 D.核移植过程中核基因发生了突变 96. 经诱导融合得到的杂种细胞还需经过下列哪项措施才能得到杂种植株

A.分离杂种细胞，直接接种便可获得 B.筛选鉴定杂种细胞后，再经植物组织培养才能获得植株

C.让杂种细胞自交，获得纯系植株 D.杂种细胞经传代培养获得细胞系，而培育成植株

四、问答题

1. 什么叫ＨＡＴ选择法？基本原理是什么？

此法最初是由Ｅ．Ｈ．Ｓzybalski和Ｗ.Ｓzybalski于１９６２年设计的．由于选择ＴＫ＋细胞的培养基含有次黄嘌呤（hypoxanthine）、氨基蝶呤(aminopterin)和胸苷(thymidine)，所以叫．．．

如果用叶酸的类似物氨基蝶呤（ＡＰＴ）处理细胞，二氢叶酸还原酶便被抑制，培养基中的还原酶辅助因子四氢叶酸因得不到补充而逐渐耗尽，于是从dＵＭＰ合成dＴＴＰ以及dＡＴＰ和dＧＴＰ的重新合成便因此被阻断．但次黄嘌呤是dＡＴＰ和dＧＴＰ补救合成途径的一种底物，培养基中补加有此种物质时，细胞能逾越氨基蝶呤的抑制作用，继续合成出这些脱氧嘌呤三磷酸（dＡＴＰ和dＧＴＰ）．同时，由于在ＨＡＴ培养基中补加有外源的胸苷，所以ＴＫ＋细胞通过胸苷激酶的作用可把它合成为dＴＴＰ，继续存活下去；而ＴＫ－细胞则不会发生这种合成，因而死亡．

2. 原生质体融合的优点有哪些？

a.大大提高细胞间基因重组的频率：二亲株中任何一株都可能起受体或供体的作用，遗传物质传递更为完整。

b.打破了微生物的种、属、科的界限，甚至可以实现更远缘微生物间的基因重组 c.存在着两株以上亲株同时参与融合形成融合子的可能性。

3.克隆动物成功与否的关键性问题有哪些？

首先是核移植过程中要分离得到供体细胞和作为受体细胞的卵细胞 。 其次要取处在适当发育阶段及细胞周期的受体和供体细胞，受体细胞和供体细胞处于细胞周期中的同一时期 ，核移植成功的几率最大。

受体细胞在细胞周期中所处的时间对转核实验成功与否的影响要大于供体细胞所处的时间的影响，一般取G2期进行核移植的效果都较好。 另外，细胞诱导分裂成熟的因子（MPF）的活性有关。

4.植物细胞培养的基本步骤是什么？

1）外植体灭菌消毒。（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上。 3）切取所需的外植体。

4）将外植体接种于培养容器的培养基上， 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！

外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织。

5.细胞融合的方法有哪些及其原理？.病毒为什么可以促使细胞融合？

１.生物学法：采用病毒促进细胞融合，如仙台病毒，因为各种能被其作用的细胞均有相应受体的缘故，它一边黏接在一个细胞表面，另外一边黏接另在一个细胞表面，从而使两个细胞在病毒的作用下靠近发生凝结。

２.化学融合剂法：PEG结合高钙、pH诱导法，由于带有大量负电荷的PEG分子和原生质体表面的负电荷间在钙离子的连接下形成静电键，促使异源的原生质体间的黏着而结合，用高钙离子和pH溶液将与质膜结合的PEG分子进行洗脱，导致电荷平衡失调并重新分配，使两种原生质体上的正负电荷连接起来，进而形成具有共同质膜的融合体。

３.电处理融合法：在直流电脉冲的诱导下，原生质体质膜表面的电荷和氧化还原电位发生改变，使异种原生质体黏合并发生质膜瞬间破裂，进而质膜开始连接，直到闭和成完整的膜形成融合体。

病毒为什么可以促使细胞融合

体细胞融合的关键是要找到一种能促使细胞融合的促融合剂。在动物细胞的最好促融合剂是仙台病毒。病毒有个特点，它能附着在宿住细胞表面，然后侵入。仙台病毒的优点在于它有若干附着位点，可以同时附着在两个不同的细胞表面。由于病毒体积很少，所以由一个病毒吸附的两个细胞靠得很近，并使细胞膜融合在一起，成为一个杂种细胞。开始时，细胞核可能并不融合，这样就构成了一个所谓的异核体。如果细胞核进一步与融合，就形成了一个真正的杂种细胞。不过这里所用的病毒先要经过灭活，它已不能侵入寄主，但并不丧失吸附的能力.

6. 多莉羊是怎么被克隆出来的?

步骤一：从一只6岁芬兰多塞特白面母绵羊（姑且称为A）的乳腺中取出乳腺细胞，将其放入低浓度的营养培养液中，细胞逐渐停止分裂，此细胞称之为“供体细胞”；步骤二：从一头苏格兰黑面母绵羊（B）的卵巢中取出未受精的卵细胞，并立即将细胞核除去，留下一个无核的卵细胞，此细胞称之为“受体细胞”；步骤三：利用电脉冲方法，使供体细胞和受体细胞融合，最后形成“融合细胞”。电脉冲可以产生类似于自然受精过程中的一系列反应，使融合细胞也能像受精卵一样进行细胞分裂、分化，从而形成“胚胎细胞”；步骤四：将胚胎细胞转移到另一只苏格兰黑面母绵羊（C）的子宫内，胚胎细胞进一步分化和发育，最后形成小绵羊--多莉。

7.为什么对动物细胞培养时要加血清？

血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。

8．植物细胞为什么能表现出全能性？

植物细胞全能性的基本含义是：植物体的每个生活细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。

9．在生物体内为什么细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织或器官呢?

是因为基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。植物细胞的全能性表达的条件：离体条件、有一定的营养物质、激素和其他外界条件。 10．在植物组培过程中，为什么要进行一系列的消毒，灭菌，并且要求无菌操作？

排除杂菌污染，避免微生物与外植体竞争，更重要的是微生物会产生毒素，危害培养物的生长甚至导致外植体死亡。

11．植物组培的培养基为什么用蔗糖？

在“植物的克隆”一节中涉及植物组织培养技术，在该技术中所用培养基的需要有适量的营养物质，其中含有蔗糖，而不是葡萄糖，原因为何?

选用蔗糖主要从以下几个方面考虑的：

①提供碳源，高压灭菌的蔗糖优于过滤灭菌的葡萄糖。因为高压灭菌能使蔗糖水解为更能被有效利用的糖份。如果糖等。

②诱导作用，在培养基成分中，增加生长素的浓度，导致木质部形成，增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。当生长素水平恒定时，2％蔗糖使分化出的全部是木质部，4％蔗糖使分化出的几乎全部是韧皮部，3％蔗糖则可以分化出两者。所以，生长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数量。因此，在植物组培中要选用蔗糖而不选用葡萄糖。

③同样作为碳源物质为植物细胞提供能量来源，蔗糖较葡萄糖能更好地调节培养基内的渗透压。配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，因此，若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同时，植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成的渗透压可相对长期的保持稳定。

④植物组织培养过程中，要时刻注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖，一般很少利用蔗糖。因此，采用蔗糖作为培养基的碳源，可一定程度上减少微生物的污染。

12．为什么诱导愈伤组织发生的过程中应避光培养？而在胚状体分化成植株过程中需要光？

对于植物组织培养来说，光照条件非常重要，包括光照强度、时间和波长。但在由高度分化的组织形成愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养，而在分化形成试管苗的再生的过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织，如果在光照条件下容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织。由愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗的过程中需要光照，原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件，实现由异养→自养的转变。

13．为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？

生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。

14．动物细胞培养的“代”指的是什么？

在“动物的克隆”一节中动物细胞培养时提到“代”。很容易把“代”与“细胞分裂次数”等同。而实际上，培养细胞的“一代”指从把细胞接种到培养瓶至分离再培养的一段期间，与细胞世代或增殖不同。在“一代”中，细胞并不只是分裂一次，一般分裂3—6次。 15．细胞系和细胞株有什么区别？

细胞系指可连续传代的细胞。原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系称为连续细胞系，不能连续培养下去的细胞系称为有限细胞系。通过一定的选择和纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，可传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。所以细胞系是泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系。 16． 为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？

不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 17． 动物难以克隆的根本原因？

在动物的个体发育过程中，分化的结果使得细胞在形态和功能上高度特化，基因表达的调控使得细胞中合成了专一的蛋白质。特化细胞的细胞核中物种基因组完整，具有全能性，但是基因组中的基因并不同时进行活动，一类基因是维持生存的；另一类基因随着组织器官和发育阶段不同而选择性表达。动物的体细胞的基因组中基因的活动并不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。

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