高效液相色谱仪验证方案15C

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LC-15C高效液相色谱仪确认报告

目 录

1 概述 2 验证目的 3 验证依据及标准 4 验证小组成员及职责 5 验证确认 5.1再确认 5.2 运行确认 5.3 性能确认 6 再验证周期 7 验证结论及评价报告 6 验证报告书批准

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1.概述

LC-15C型高效液相色谱仪为岛津公司生产的产品，为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。 2.验证目的

确认LC-15C高效液相色谱仪的运行、性能确认符合相应的要求，为日常检验提供准确的检测结果。 3.验证依据及标准

《药品GMP指南》2010年版

《LC-15C型高效液相色谱仪标准操作规程》 《中国药典》2010年版二部附录 4. 验证小组成员及职责 4.1化验室职责

负责起草确认方案、总结报告；

负责整个确认方案的实施，并做记录、总结报告； 4.2质量部职责

做好过程监控，确保方案执行过程符合法规要求； 负责确认方案的审核； 负责确认实施的协调。 4.3 人员组成

部 门 化验室 质量部 5.验证确认 5.1再确认 仪器名称： 生产厂家： 5.1.1检查有关资料完整性。

名 称 是否齐全 存放处 型号： 所在地点： 成 员 第3共 14 页

LC-15C高效液相色谱仪使用说明书 紫外-可见光检测器使用说明书 柱温控制箱使用手册 合格证 保修卡 备件清单 检定合格证 仪器使用记录 5.1.2安装场地 项 目 位 置 洁净度 环 境 电 路 温度 相对湿度 电源 接地 要 求 检查情况 应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火 室内应保持清洁,无腐蚀性气体 20～30℃，全天温度变化较小 40～85% AC220V〒10V、50HZ〒1HZ 应接地 5.2运行确认：

严格按《LC-15C高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验， 5.3性能确认

5.3.1 泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR的检定

可执行标准： 流量设定值（ml/min） 测量次数 流动相收集时间/min 允许误差 SS SR 0.5 3 10 5% 3% 1.0 3 5 3% 2% 2.0 3 5 2% 2% 测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、2.0ml/min三段，在流动相出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称

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重，按下式计算SS和SR。

Fm=(W2-W1)/ρ·t Ss = (Fm-Fs)/Fs ×100% SR=(Fman-Fmin)/F 〓100% 其中：Fm为流量实测值(ml/min)， Fs为流量设定值(ml/min)，

W2为容量瓶加流动相的重量(g)， W1为容量瓶的重量(g)， ρ为实验温度下流动相的密度(g/cm3)， t为收集流动相的时间（min), Fmax为同一组测量中流量最大值（ml/min）, Fmin为同一组测量中流量最小值（ml/min）, F为同一组测量值的算数平均值（ml/min）。

5.3.2柱温箱：柱箱温度设定值误差ΔTs和控温稳定性Tc的检定

将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择35℃和45℃进行检定。按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值。平均值与设定值之差为ΔTs（〈〒2℃），7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性Tc（≤1℃）。 5.3.3紫外可见光液相色谱检测器 5.3.3.1噪声与漂移

可执行标准：噪声 ＜〒1.0〓10-2mv(250nm)， 漂移 ＜〒5.0〓10-2mv/hr 测试方法：取用C18色谱柱，将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30~40分钟，计算基线漂移和噪声。（基线漂移应≤5〓10-3(AU/h), 基线噪声应≤2〓10-4(AU)）。

5.3.3.2最小检测浓度的测定【要求：≤1〓10-7g/ml（萘的甲醇溶液）】

取用C18色谱柱，将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，开机预热，待稳定后用注射器注入1〓10-7g/ml萘的甲醇溶液20μl，样品峰高应大于或等于两倍基线燥声峰高，按下式计算最小检测浓度。 CL=2〃Hs .C/H

式中：CL:最小检测浓度（g/ml）; Hs:噪声峰高（记录仪格数或实测高度mm）

C:样品浓度（g/ml） ; H:样品峰高（记录仪格数或实测高度mm）

5.3.4 整机性能的检定（定性、定量重复性）

精密量取二甲苯和苯适量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀释成每1ml含上述两种物质都为0.002ml的溶液，摇匀；以甲醇为流动相，精密量取上述溶液20μl 注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。以此检查仪器的定性重复性和定量重复性，定性重复性RSD≤1.0%，定量重复性RSD≤2.0%。

6 偏差处理：检验方法确认中，应严格按照确认方案、《中国药典》2010年版二部等进行操作和判定。如出现个别项目不符合标准的结果时，应按下列程序进行处理：

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6.1 按检验结果超标（OOS）进行调查和处理。

6.2 若确认为方法不适用的问题，则应建立适用的新方法，新方法应经过确认并经过批准。

7 确认结果及评价 8 再验证及周期

8.1 资料确认：检查有关资料完整性。

8.2 性能验证：泵的流量准确度、流量精确度；柱箱温度设定值误差ΔTs和控温稳定性Tc；检测器的噪声与漂移、定性定量重复性、最小检出浓度。 8.3 正常情况下每年做一次验证。

8.4 实验条件发生改变（如关键设备或系统的改动）性须重新验证。 8.5 仪器更新或大修。 9. 验证报告书批准

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LC-15C高效液相色谱仪确认报告

目 录

1.概述 2.确认结果 2.1安装再确认 2.2运行确认 2.3性能确认 3. 偏差处理 4. 确认结果及评价 5. 再确认周期 6. 验证报告书批准 7. 附录

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1.概述

LC-15C型高效液相色谱仪为岛津公司生产的产品，为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。 2.确认结果 2.1安装再确认 仪器名称： 生产厂家： 2.1.1检查有关资料完整性。

名 称 LC-15C高效液相色谱仪使用说明书 紫外-可见光检测器使用说明书 柱温控制箱使用手册 合格证 保修卡 备件清单 检定合格证 仪器使用记录 2.1.2安装场地

项 目 位 置 洁净度 环 境 电 路 温度 相对湿度 电源 接地 要 求 应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火 室内应保持清洁,无腐蚀性气体 20～30℃，全天温度变化较小 40～85% AC220V〒10V、50HZ〒1HZ 应接地 检查情况 是否齐全 存放处 型号： 所在地点： 单项结论：

检测人： 日期： 年 月 日

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复核人： 日期： 年 月 日

2.2运行确认：

严格按《LC-15C高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验， 2.3性能确认

2.3.1 泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR的检定

可执行标准： 流量设定值（ml/min） 测量次数 流动相收集时间/min 允许误差 SS SR 0.5 3 10 5% 3% 1.0 3 5 3% 2% 2.0 3 5 2% 2% 测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、2.0ml/min三段，在流动相出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按下式计算SS和SR。

Fm=(W2-W1)/ρ·t Ss = (Fm-Fs)/Fs ×100% SR=(Fman-Fmin)/F 〓100% 其中：Fm为流量实测值(ml/min)， Fs为流量设定值(ml/min)，

W2为容量瓶加流动相的重量(g)， W1为容量瓶的重量(g)， ρ为实验温度下流动相的密度(g/cm3)， t为收集流动相的时间（min), Fmax为同一组测量中流量最大值（ml/min）, Fmin为同一组测量中流量最小值（ml/min）, F为同一组测量值的算数平均值（ml/min）。

输液泵流量设定值误差Ss、流量温度定性误差SR的检定原始记录见附录一。

结论：

检测人： 日期： 年 月 日

复核人： 日期： 年 月 日

2.3.2柱温箱：柱箱温度设定值误差ΔTs和控温稳定性Tc的检定

将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择35℃和45℃进行检定。按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值。平均值与设定值之差为ΔTs（〈〒2℃），7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性Tc（≤1℃）。

柱温箱柱箱温度设定值误差ΔTc的检定原始记录见附录二。

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结论： 。

检测人： 日期： 年 月 日

复核人： 日期： 年 月 日

2.3.3紫外可见光液相色谱检测器 2.3.3.1噪声与漂移

可执行标准：噪声 ＜〒1.0〓10-2mv(250nm)， 漂移 ＜〒5.0〓10-2mv/hr 测试方法：取用C18色谱柱，将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30~40分钟，计算基线漂移和噪声。（基线漂移应≤5〓10-3(AU/h), 基线噪声应≤2〓10-4(AU)）。 测试图谱见基线漂移测试。

结论：

检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日

2.3.3.2最小检测浓度的测定【要求：≤1〓10-7g/ml（萘的甲醇溶液）】

取用C18色谱柱，将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，开机预热，待稳定后用注射器注入1〓10-7g/ml萘的甲醇溶液20μl，样品峰高应大于或等于两倍基线燥声峰高，按下式计算最小检测浓度。 CL=2〃Hs .C/H

式中：CL:最小检测浓度（g/ml）; Hs:噪声峰高（记录仪格数或实测高度mm）

C:样品浓度（g/ml） ; H:样品峰高（记录仪格数或实测高度mm）

结论：

检测人： 日期： 年 月 日

复核人： 日期： 年 月 日

2.3.4 整机性能的检定（定性、定量重复性）

精密量取二甲苯和苯适量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀释成每1ml含上述两种物质都为0.002ml的溶液，摇匀；以甲醇为流动相，精密量取上述溶液20μl 注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。以此检查仪器的定性重复性和定量重复性，定性重复性RSD≤1.0%，定量重复性RSD≤2.0%。 定性、定量重复性原始记录见附录三。

结论：

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检测人： 日期： 年 月 日

复核人： 日期： 年 月 日 3. 偏差处理

检验方法确认中，严格按照确认方案、《中国药典》2010年版二部等进行操作和判断，未出现偏差。 4. 确认结果及评价

根据确认结果的分析，确认过程中是否有不可接受偏差存在，确认原子吸收分光光度计各个方面是否符合规定。说明该红外分光光度计测定数据是否准确可靠，是否可持续达到预定的效果，适用于检验要求。 1、主要试验结果： 项目 标准 验证结果 是否符合规定 安装再确认 安装的地点及条件符合要求 流量稳定 仪器的性能泵流量设定值误差SS、性误差SR应符合规定 确认 柱箱温度设定值误差ΔTs和控 温稳定性Tc应符合规定 噪声 ＜〒1.0〓10-2mv(250nm)， 漂移 ＜〒5.0〓10-2mv/hr 最小检测浓度≤1〓10-7g/ml 定性重复性RSD≤1.0%，定量重 复性RSD≤2.0% 2、结果的分析、建议 报告人： 年 月 日 3、会签 重要试验结果是否完整： 完整□ 欠缺 □ 不合格□ 试验结果可靠性： 可靠□ 尚需重试□ 评价结果： 合格□ 不合格□ 会签人： 验证小组负责人： 年 月 日

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5 再验证周期

5.1 设备大修后需再确认。

5.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再确认。

5.3 更换主要部件或对仪器性能有怀疑时，应进行再确认。 6. 验证报告书批准 验证项目名称 LC-15C高效液相色谱仪验证方案及报告 1、检查并确认LC-15C高效液相色谱仪安装符合设计要验证目的 求。 2、确认LC-15C高效液相色谱仪的运行性能。 3、LC-15C高效液相色谱仪性能指标达到设定技术指标。 验证方案及验证报告编号 该验证项目及验证报告已经审核无误，予以批准。特此证明。 本验证项目有效期 自 年 月 日至 年 月 日止。 验证管理部门负责人签字： 年 月 日 第13共 14 页

附录一：输液泵流量设定值误差Ss、流量温度定性误差SR的检定原始记录 流动相 流量设定值 收集时间t W1 W2 W2 - W1 ρt ·t Fm Fm的平均值 Ss SR Ts1 Ts2 序号 读数 ΔTs2 次数 组分1保留时间 组分2保留时间 组分1与组分2保留时间差 RSD% 次数 组分1峰面积 组分2峰面积 组分1与组分2峰面积比 RSD%

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0.5 ml/min 10min 序号 读数 ΔTs1 1 1 2 2 1 1 2 3 3 1.0 ml/min 5min 4 Tc1 4 Tc2 2 密度ρt 2.0ml/min 5min 5 6 7 平均 附录二：柱箱温度设定值误差ΔTs和控温稳定性Tc的检定原始记录 5 6 7 平均 附录三：A、定性重复性:取两组分保留时间差进行计算。 3 4 5 B、定量重复性:取两组分峰面积比进行计算。 3 4 5

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